白細胞介素17D(IL-17D)在惡性腫瘤進展中作用的研究.pdf

1、目的:惡性腫瘤是一類由于控制細胞增殖機制失常而引起的疾病。根據世界衛(wèi)生組織公布的數(shù)據顯示，2012年全球約有820萬人死于惡性腫瘤，其中中國因惡性腫瘤死亡的人數(shù)占全世界的26.9％。目前我國居民惡性腫瘤的發(fā)病率為285.91/10萬，因惡性腫瘤導致的死亡占總數(shù)的13％。進展迅速是惡性腫瘤的生物學特征之一，而惡性腫瘤在體內的進展速度受到多種因素的影響。其中，人體的固有免疫系統(tǒng)是影響惡性腫瘤進展的重要因素。固有免疫系統(tǒng)可能在腫瘤進展的過程中

2、起到雙向作用，即固有免疫系統(tǒng)中的特定細胞類型可能對惡性腫瘤的進展起到抑制作用，而某些細胞類型則相反地促進惡性腫瘤的進展。早期的研究顯示白細胞介素(白介素、Interleukin、IL)是一組表達在白細胞中的細胞因子，但近年來的研究發(fā)現(xiàn)白細胞介素可以表達于各種類型的細胞。白介素可以通過刺激免疫細胞增殖、分化，在局部募集特定類型的免疫細胞，或通過刺激或抑制免疫細胞生成某些細胞因子達成調節(jié)免疫系統(tǒng)功能的作用。在一項最近的研究中，IL-17D被

3、證實可以刺激內皮細胞產生IL-6、IL-8及GM-CSF等一系列免疫系統(tǒng)相關的細胞因子，顯示出通過固有免疫系統(tǒng)調控惡性腫瘤進展的潛力。本研究旨在研究在特異性免疫缺失的情況下，IL-17D是否可以通過調控固有免疫反應影響惡性腫瘤在體內的進展，并進一步探討其調控固有免疫反應的機制，從而明確IL-17D對惡性腫瘤進展的影響，并為惡性腫瘤的免疫治療提供理論依據。
　　方法:本研究采取病毒穩(wěn)定轉染的方法，以HTB-77、HTB-161兩種卵

4、巢癌細胞系為母本，制作了HTB-77（IL-17D）、HTB-161(IL-17D)2種IL-17D高表達細胞系及HTB-77(Ctrl)、HTB-161(Ctrl)2種IL-17D正常表達的對照組細胞系。使用細胞體外培養(yǎng)及免疫缺陷小鼠模型兩種實驗技術，探討了IL-17D與腫瘤細胞增殖及腫瘤在體內進展的關系。并進一步使用流式細胞學方法分析小鼠體內的腫瘤組織中各種免疫細胞亞型所占總體免疫細胞的比例，旨在分析IL-17D影響惡性腫瘤進展的可

5、能機制。
　　本實驗的數(shù)據統(tǒng)計分析應用了SPSS13.0軟件。對接種了不同數(shù)量及類型卵巢癌細胞小鼠的無瘤生存時間采用方差分析的檢驗方法，比較不同水平的IL-17D表達是否影響腫瘤在小鼠體內的進展速度。采用t檢驗，比較了IL-17D高表達腫瘤組織及IL-17D正常表達腫瘤組織中免疫細胞(CD45+)、M1/M2型巨噬細胞、中性粒細胞、N1/N2型中性粒細胞及樹突狀細胞募集比例的差異。以P＜0.05作為顯著性差異的標準。
　　結

6、果:
　　1轉染攜帶IL-17D基因病毒的HTB-77(IL-17D)及HTB-161(IL-17D)細胞中IL-17D表達顯著高于原始HTB-77及HTB-161細胞，轉染攜帶空白對照基因病毒的HTB-77（Ctrl）及HTB-161(Ctrl)中IL-17D表達與原始HTB-77及HB-161相比無顯著差異。
　　2體外細胞培養(yǎng)顯示，IL-17D表達對卵巢癌細胞在體外增殖速度無顯著影響。
　　3動物實驗顯示，IL-

7、17D高表達的卵巢癌細胞在特異性免疫缺失的小鼠體內進展速度明顯高于IL-17D正常表達的卵巢癌細胞。
　　4流式細胞學分析顯示，IL-17D高表達卵巢癌組織中的免疫細胞(CD45+)占總體細胞比例與對照組卵巢癌組織無顯著差異，M1型巨噬細胞及樹突狀細胞占總體免疫細胞的比例顯著低于對照組，中性粒細胞（包括N1/N2型中性粒細胞）占總體免疫細胞的比例顯著高于對照組。
　　結論:在特異性免疫缺失的條件下，IL-17D可以調控腫瘤組