親和色譜法研究五種中藥活性成分與固定化人血清白蛋白的相互作用.pdf

1、開展中藥小分子特別是多組分分子與蛋白質(zhì)相互作用研究，可望為中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中的中藥藥理、中藥活性成分篩選、藥物分子結(jié)構(gòu)改造、科學(xué)理解傳統(tǒng)中藥復(fù)方以及藥物配伍等環(huán)節(jié)提供理論依據(jù)和指導(dǎo)。本論文利用親和色譜，采用前沿色譜和競爭置換實驗方式，研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素、綠原酸、香草酸等五種中藥活性成分與固定化人血清白蛋白(HSA)的相互作用，具體工作如下： 1．采用前沿色譜法測定這五種中藥活性成分在固定化HSA柱上的吸附量，應(yīng)用Lang

2、muir和Bi—Langmuir兩種結(jié)合等溫線模型判斷五種中藥活性成分與固定化HSA的結(jié)合位點(diǎn)種類數(shù)。結(jié)果表明，阿魏酸、丹皮酚、綠原酸、香草酸與HSA均只存在一類結(jié)合位點(diǎn)，而葛根素與HSA存在兩類結(jié)合位點(diǎn)。 2．采用競爭置換法中的自我競爭方式測定了這五種中藥活性成分與HSA的結(jié)合常數(shù)，發(fā)現(xiàn)它們與HSA之間的結(jié)合屬于弱結(jié)合作用。 3．采用競爭置換法中的相互競爭方式研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素三種中藥活性成分之間的相互競爭行

3、為。結(jié)果表明，阿魏酸與丹皮酚競爭HSA上的同一類結(jié)合位點(diǎn)，且阿魏酸和丹皮酚共同競爭葛根素與HSA的一類結(jié)合位點(diǎn)。對中醫(yī)理論上常用含有阿魏酸、丹皮酚、葛根素的中藥配伍使用增強(qiáng)彼此療效的現(xiàn)象進(jìn)行了解釋。利用探針試劑判斷阿魏酸和丹皮酚與HSA作用的具體蛋白結(jié)合域為indole位點(diǎn)(siteⅡ)。 4．研究了溫度對其中四種中藥活性成分與固定化HSA相互作用的影響，并根據(jù)熱力學(xué)參數(shù)判斷它們與HSA的作用力類型。結(jié)果表明，阿魏酸和丹皮酚與H