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文檔簡介
1、白色念珠菌是一種寄生于健康人體的正常菌群,在機體的免疫力下降或者正常菌群失調的情況下,就會轉變成致病菌。免疫抑制劑的應用增加了病人對念珠菌的易感性,使醫(yī)院內患者念珠菌感染的發(fā)病率不斷增加。 熱休克蛋白90(Hsp90)是白色念珠菌在侵染機體過程中分泌的一種毒性因子,同時,作為念珠菌的一種免疫優(yōu)勢抗原,可以誘導感染機體產生特異性抗體。Matthews和本實驗室的工作證明,抗Hsp90的抗體是一種保護性抗體。 本課題組已經證
2、明,噬菌體展示的表位能夠誘導小鼠產生體液免疫應答和細胞免疫應答。在念珠菌感染過程中,CD4<'+>T細胞的分化方向是決定機體對念珠菌感染抗性或易感性的重要方面。為了進一步研究噬菌體作為表位載體,誘導小鼠產生細胞因子的類型,本研究利用展示有C表位的雜合噬菌體、野生噬菌體和與匙孔血藍蛋白(KLH)偶聯的化學合成C表位(KLH-C),免疫C57BL/6J小鼠,再采用定量ELISA方法,檢測脾細胞培養(yǎng)上清中分泌細胞因子的水平。同時用RT-PCR
3、方法分析了mRNA水平上細胞因子的轉錄,確定了檢測小鼠體內脾中Th1和Th2型細胞因子的轉錄。得到的結果如下: 1.噬菌體作為疫苗載體可以增強免疫鼠脾細胞Th1型細胞因子的轉錄。雜合噬菌體、野生噬菌體和KLH-C免疫小鼠體內脾中Th1型細胞因子,IFN-γ、IL-2和IL-12的轉錄水平相似,與TE對照組比較,差異顯著。IL-10在免疫鼠和對照鼠間的轉錄水平相似。 2.噬菌體作為疫苗載體可以誘導免疫鼠的脾細胞分泌Th1型
4、細胞因子。雜合噬菌體免疫小鼠的脾細胞培養(yǎng)上清中,Th1型細胞因子,IFN-γ和IL-12的蛋白分泌水平與TE對照組比較,具有顯著性差異,與KLH-C免疫小鼠相似。Th2型細胞因子,IL-10的分泌水平在免疫組和對照組之間沒有差異。 因此,噬菌體作為疫苗載體,能夠通過增強Th1型細胞因子的轉錄誘導Th1型細胞因子的產生,與傳統(tǒng)的化學載體KLH相比,具有相似的作用。而且其制備簡單、省時省力的優(yōu)點使噬菌體作為表位載體在疫苗研究中具有廣
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