噬菌體作為疫苗載體誘導(dǎo)小鼠脾細胞產(chǎn)生細胞因子類型的研究.pdf

1、白色念珠菌是一種寄生于健康人體的正常菌群，在機體的免疫力下降或者正常菌群失調(diào)的情況下，就會轉(zhuǎn)變成致病菌。免疫抑制劑的應(yīng)用增加了病人對念珠菌的易感性，使醫(yī)院內(nèi)患者念珠菌感染的發(fā)病率不斷增加。 熱休克蛋白90(Hsp90)是白色念珠菌在侵染機體過程中分泌的一種毒性因子，同時，作為念珠菌的一種免疫優(yōu)勢抗原，可以誘導(dǎo)感染機體產(chǎn)生特異性抗體。Matthews和本實驗室的工作證明，抗Hsp90的抗體是一種保護性抗體。 本課題組已經(jīng)證

2、明，噬菌體展示的表位能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答。在念珠菌感染過程中，CD4<'+>T細胞的分化方向是決定機體對念珠菌感染抗性或易感性的重要方面。為了進一步研究噬菌體作為表位載體，誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生細胞因子的類型，本研究利用展示有C表位的雜合噬菌體、野生噬菌體和與匙孔血藍蛋白(KLH)偶聯(lián)的化學(xué)合成C表位(KLH-C)，免疫C57BL/6J小鼠，再采用定量ELISA方法，檢測脾細胞培養(yǎng)上清中分泌細胞因子的水平。同時用RT-PCR

3、方法分析了mRNA水平上細胞因子的轉(zhuǎn)錄，確定了檢測小鼠體內(nèi)脾中Th1和Th2型細胞因子的轉(zhuǎn)錄。得到的結(jié)果如下： 1．噬菌體作為疫苗載體可以增強免疫鼠脾細胞Th1型細胞因子的轉(zhuǎn)錄。雜合噬菌體、野生噬菌體和KLH-C免疫小鼠體內(nèi)脾中Th1型細胞因子，IFN-γ、IL-2和IL-12的轉(zhuǎn)錄水平相似，與TE對照組比較，差異顯著。IL-10在免疫鼠和對照鼠間的轉(zhuǎn)錄水平相似。 2．噬菌體作為疫苗載體可以誘導(dǎo)免疫鼠的脾細胞分泌Th1型

4、細胞因子。雜合噬菌體免疫小鼠的脾細胞培養(yǎng)上清中，Th1型細胞因子，IFN-γ和IL-12的蛋白分泌水平與TE對照組比較，具有顯著性差異，與KLH-C免疫小鼠相似。Th2型細胞因子，IL-10的分泌水平在免疫組和對照組之間沒有差異。 因此，噬菌體作為疫苗載體，能夠通過增強Th1型細胞因子的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)Th1型細胞因子的產(chǎn)生，與傳統(tǒng)的化學(xué)載體KLH相比，具有相似的作用。而且其制備簡單、省時省力的優(yōu)點使噬菌體作為表位載體在疫苗研究中具有廣