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文檔簡介
1、目的:觀察高滲透壓對兔髓核細胞活性的影響及JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在此過程中的作用。
方法:不同滲透壓及時間段處理髓核細胞后采用MTT實驗檢測細胞活性并運用流式細胞儀檢測髓核細胞凋亡情況,同時利用免疫熒光和Westernblot技術(shù)檢測磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(Phospho-P38mitogen-activatedproteinkinases,P-P38MAPK)、磷酸化JNK/SAPK激酶(Phosp
2、ho-c-JunN-terminalkinases/Stress-activatedproteinkinases,P-JNK/SAPK)的亞細胞定位及表達水平,觀察其對髓核細胞凋亡的影響。
結(jié)果:高滲透壓(600mOsm)可導(dǎo)致髓核細胞顯著凋亡及P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達水平改變。600mOsm各實驗組凋亡細胞均與對照組有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),相應(yīng)阻斷組凋亡細胞明顯減少,400mOsm各實驗
3、組和阻斷組凋亡細胞與對照組相比均無明顯差異;免疫熒光結(jié)果顯示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細胞質(zhì)和細胞核中均有表達;經(jīng)高滲透壓(600mOsm)壓刺激后P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表達均顯著高于對照組(P<0.01),而相應(yīng)阻斷組P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表達均顯著降低。
結(jié)論:高滲透壓通過激活JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路導(dǎo)致體外培養(yǎng)的兔髓核細胞凋亡,同時髓核細胞對輕度的滲
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