茶多酚與亞硒酸鈉的抗氧化作用對酒精性肝病的影響的實驗研究.pdf

1、目的：本課題采用大鼠酒精灌胃的方法建立酒精性肝病(ALD)早期病變動物模型，建模同時加以茶多酚、亞硒酸鈉抗氧化劑干預。通過血清肝臟酶學、脂質過氧化指標檢測、石蠟切片觀察評價、電鏡超微結構檢查、半定量RT-PCR、ELISA、免疫組化等實驗方法綜合評價各組動物病變情況及相關指標。探討茶多酚抗氧化作用對ALD的治療可能的機制；以及亞硒酸鈉對ALD病變影響并分析可能的原因。 方法：42只雌性Wistar大鼠隨機分為四組：對照組、模型組

2、、亞硒酸鈉干預組、茶多酚干預組。以55度紅星牌二鍋頭白酒加2g/kg/d的玉米油灌胃的方式建模。酒精劑量8ml-15ml/kg/d．每周遞增，兩干預組建模同時加以茶多酚(0.25g/kg/d)及亞硒酸鈉(0.4mg/kg/d)干預病變進程。實驗達七周時采取下腔靜脈血分離血清，檢測AST、ALT、MDA水平。肝組織石蠟切片HE染色結合蘇丹Ⅳ特染觀察脂變、炎癥細胞浸潤、肝細胞細胞壞死及纖維化情況。透射電鏡觀察模型組、茶多酚干預組肝細胞線粒體

3、、內質網(wǎng)、脂滴產(chǎn)生等超微結構改變。肝組織半定量RT-PCR、血清ELISA法、肝組織免疫組化檢測TNF-α表達，免疫組化檢測肝組織內Caspase-3的表達情況。 結果：1．模型組與對照組血清及形態(tài)學檢查顯示造模成功且二組有統(tǒng)計學差異(P<0.05)，ALD模型成功。2．茶多酚干預組與模型組比較：茶多酚干預組肝小葉內脂滴減少，組織學評分明顯低于模型組，P<0.05。AST絕對值低于模型組，P<0.05。ALT無統(tǒng)計學差異。MDA

4、絕對值低于模型組，P<0.05。TNF-α三種檢測方法結果絕對值均低于模型組，P<0.05。免疫組化Caspase-3面密度值與模型組比較有統(tǒng)計學差異。P<0.05。TNF-α與Caspase-3的免疫組化相關性分析顯示二者直線相關。3．亞硒酸鈉干預組與模型組相比：脂變細胞明顯增多，但肝小葉內肝細胞壞死、炎癥細胞浸潤程度輕于模型組。AST、TNF-α檢測結果與模型組比較無統(tǒng)計學差異。P>0.05。MDA、Caspase-3有統(tǒng)計學差異。