三種抗菌蛋白在正常大鼠體內(nèi)的分布及環(huán)磷酰胺對(duì)其表達(dá)量的影響.pdf

1、目的：研究抗菌蛋白殺菌/滲透增強(qiáng)蛋白(BPI)、β-防御素(DF)-1和血小板型磷脂酶A2(PLA2) mRNA在正常大鼠體內(nèi)多個(gè)器官或組織中的存在情況，為了解和應(yīng)用抗菌蛋白提供重要信息。研究環(huán)磷酰胺對(duì)正常大鼠體內(nèi)抗菌蛋白mRNA表達(dá)水平的影響，以進(jìn)一步了解環(huán)磷酰胺的免疫抑制機(jī)制。 方法：取大鼠各器官或組織50～100mg，Trizol試劑法提取總RNA，經(jīng)RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增大鼠BPI、β-DF-1和血小板型PLA2的DNA片

2、段，PCR產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳后觀察并測(cè)序。給大鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(40mg/kg)，連續(xù)5天；對(duì)照組注射等體積的生理鹽水，制模成功后取組織分別檢測(cè)BPI、β-DF-1和血小板型PLA2 mRNA含量。 結(jié)果：(1)遍及全身的21種器官和組織中，腎、卵巢、睪丸、肝臟、小腸、大腸、胸腺、脾臟和白細(xì)胞等9種器官中都能檢測(cè)到BPI的mRNA，其中，在睪丸中最為豐富，在肝臟、大腸中較為豐富。(2)遍及全身的21種器官和組織中，氣管、心臟、腎臟

3、、子宮、卵巢、睪丸、肝臟、胃、小腸、胸腺、腦和皮膚等12種器官或組織中能檢測(cè)到β-DF-1的mRNA，其中，在氣管、心臟、腎臟、胃、卵巢和皮膚中較為豐富。DNA測(cè)序確定PCR產(chǎn)物為DF，且與已知的DF結(jié)構(gòu)完全一致。(3)在大鼠的7種生殖器官和組織中，睪丸、附睪和卵巢均能檢測(cè)到BPI、β-DF-1和血小板型PLA2的mRNA，其中以睪丸中的BPI mRNA、附睪中的β-DF-1 mRNA和卵巢中的血小板型PLA2 mRNA含量尤為豐富。另

4、外，在前列腺、子宮、陰道中也能檢測(cè)到β-DF-1和血小板型PLA2的mRNA。(4)BPI在NS組睪丸、附睪、胸腺、肝、小腸、大腸中都有表達(dá)；CTX組中在胸腺、肝中無(wú)表達(dá)，其它器官中有表達(dá)，但含量比NS組要低。β-DF-1在NS組睪丸、附睪、胸腺、肝、小腸中有表達(dá)，尤以附睪含量最為豐富；而CTX組中，在睪丸、胸腺、肝、大腸卻無(wú)表達(dá)，僅在附睪、小腸中有表達(dá)，且含量低于NS組。血小板型PLA2在NS組大鼠睪丸、附睪、胸腺、肝、小腸、大腸中都

5、有表達(dá)，尤以胸腺、大腸中表達(dá)量高；而在CTX組中，睪丸、胸腺中無(wú)表達(dá)，其它器官中雖有表達(dá)，但含量比NS組稍低。 結(jié)論：1.BPI、β-DF-1的mRNA在正常大鼠體內(nèi)多個(gè)器官和組織中都存在，提示它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)控制細(xì)菌感染的作用較為廣泛。2.BPI、β-DF-1和血小板型PLA2在大鼠生殖系統(tǒng)中廣泛存在，提示其在防御生殖系感染方面起了重要的作用。3.環(huán)磷酰胺對(duì)抗菌蛋白的表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，提示環(huán)磷酰胺對(duì)機(jī)體的免疫抑制作用不僅通過(guò)抑制骨