人胃癌Runx3基因CpG島甲基化的關(guān)鍵位點(diǎn)和演進(jìn).pdf

1、Runx3(PEBP2αC/CBFA3/AML2)是新近發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因，屬于runt結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子家族成員，參與對(duì)細(xì)胞生長和凋亡的調(diào)控。近年來，大量的研究表明Runx3與多種惡性腫瘤尤其是與胃癌的關(guān)系非常密切，因此有望成為胃癌診斷的特異性標(biāo)志物和基因治療的靶點(diǎn)。但目前國內(nèi)外眾多文獻(xiàn)報(bào)道的胃癌Runx3基因甲基化陽性率差異較大，且其與Runx3表達(dá)并不完全平行。因此Runx3基因CpG島不同位點(diǎn)甲基化對(duì)于該基因沉默的作用可能不同。

2、 目的: 研究人胃癌Runx3基因CpG島甲基化的關(guān)鍵位點(diǎn)和演進(jìn)。 材料與方法: 1、材料 26例人胃癌和相應(yīng)的癌旁正常組織均來自中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院2006年2月至2006年12月手術(shù)切除并于-80℃保存的標(biāo)本，其中男性16例，女性10例，年齡24-80歲，平均58.7歲；分化情況：低分化(未分化或低分化)17例，高分化(中分化或高分化)9例；國際抗癌聯(lián)盟分期(UICC，1997)：Ⅰ期7例，Ⅱ

3、期4例，Ⅲ期8例，Ⅳ期7例。 2、甲基化特異性PCR(MSP)應(yīng)用MSP法檢測上述組織標(biāo)本中Runx3基因CpG島從5'區(qū)向轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)方向連續(xù)6個(gè)位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)，并計(jì)算所有位點(diǎn)甲基化的陽性率。 3、Western blot應(yīng)用western blot法檢測上述組織標(biāo)本中Runx3蛋白的表達(dá)，取Runx3蛋白的灰度值/Tubulin的灰度值代表Runx3蛋白的相對(duì)表達(dá)水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)