雞RE、MD和LL三種腫瘤病診斷方法的建立.pdf

1、禽傳染性腫瘤病是由多種病毒引起的禽的一類傳染性疾病。常見的引起家禽傳染性腫瘤病的病毒有馬立克氏病病毒(Marek's disease virus)、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus)和禽白血病病毒(Avian L,eucosis virus)。禽淋巴細(xì)胞性白血病(Lympholytic leucosis)，馬立克氏病和網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病在形態(tài)學(xué)上有相似之處，難以區(qū)分。 研究的主要內(nèi)容

2、為： ①對(duì)其中兩種病毒的標(biāo)準(zhǔn)毒株進(jìn)行培養(yǎng)和復(fù)壯； ②建立了馬立克氏病病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒和禽白血病病毒的PCR檢測(cè)技術(shù)； ③對(duì)39例發(fā)病雞進(jìn)行了病理學(xué)組織的診斷，并用PCR技術(shù)對(duì)臨床病例進(jìn)行了檢測(cè)； ④用REV-T株、REV-SNV株和MDV-京1株進(jìn)行了人工感染實(shí)驗(yàn)。研究結(jié)果為了解禽三種腫瘤性疾病的發(fā)生和診斷提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 研究結(jié)果表明： 雞胚成纖維細(xì)胞在接種REV和ALV病毒

3、后，與正常細(xì)胞相比無明顯變化。根據(jù)LTR設(shè)計(jì)RE和LL的特異性引物，根據(jù)132bp的重復(fù)序列設(shè)計(jì)MD的特異性引物。MD、RE和LL三種病毒的PCR反應(yīng)可在相同條件下進(jìn)行，擴(kuò)增產(chǎn)物大小分別為132bp的重復(fù)片段、291bp和182bp。 臨床病例的病理學(xué)檢查表明，在肝、脾、腎、法氏囊、腺胃、心肌等組織中均可見到明顯的呈灶狀或彌散性增生的瘤細(xì)胞，并出現(xiàn)瘤細(xì)胞核分裂像。 用建立的PCR方法對(duì)臨床采集到的39例雞腫瘤性病料進(jìn)行了

4、檢測(cè), 檢查結(jié)果為： ①13例為馬立克氏病陽性，檢出率為33.3％； ②1例淋巴細(xì)胞性白血病陽性，檢出率為2.6％； ③5例為馬立克氏病和淋巴細(xì)胞性白血病混合陽性，檢出率為12.8％。在臨床病例中未檢測(cè)到網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病毒的存在，這一結(jié)果與網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果一致。 利用馬立克氏病的標(biāo)準(zhǔn)毒株京-1株和網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病的標(biāo)準(zhǔn)毒株SNV株和REV-T株對(duì)SPF雞分別進(jìn)行人工感