Ⅰ類新藥艾普拉唑的臨床藥物代謝動力學(xué)研究.pdf

1、Ⅰ類新藥艾普拉唑是麗珠制藥公司研發(fā)的新一代強效質(zhì)子泵抑制劑,它是治療胃腸道相關(guān)疾病的抑酸劑。本文是研究艾普拉唑的測定方法、艾普拉唑代謝產(chǎn)物、艾普拉唑的藥代動力學(xué)以及抗幽門螺桿菌三聯(lián)用藥方案對艾普拉唑和克拉紅霉素藥物代謝動力學(xué)的影響等四個方面。
　　 一、液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定血漿中艾普拉唑及其代謝產(chǎn)物及在藥代動力學(xué)上的應(yīng)用
　　 目的:建立快速、靈敏的液相色譜.串聯(lián)質(zhì)譜法測定人血漿中的艾普拉唑及其代謝產(chǎn)物,用于受試者口

2、服艾普拉唑后的藥代動力學(xué)研究。
　　 方法:選用Thermo HyPURITY C18柱,流動相為10mM甲酸胺水溶液:乙腈(50:50),柱溫30度,三重四極桿質(zhì)譜以多反應(yīng)監(jiān)測方式進行檢測,檢測的離子:艾普拉唑m/z367.2→184.0;艾普拉唑砜:m/z:383.3→184.1;艾普拉唑硫醚:m/z:351.2→168.1;內(nèi)標奧美拉唑:m/z:346.2→198.0。12名健康受試者分別口服5mg的艾普拉唑腸溶片在0-4

3、.8h采血,用建立的LC-MS/MS方法檢測其體內(nèi)艾普拉唑及其兩個代謝產(chǎn)物的血藥濃度。
　　 結(jié)果:其線性范圍艾普拉唑為0.23-2400.00 ng/mL;艾普拉唑砜為0.05-105.00 ng/mL;艾普拉唑硫醚為0.06-45.00 ng/mL。LLOQ分別為0.23、0.05和0.06ng/mL。
　　 結(jié)論:該方法靈敏度高,實用性強,適用于臨床藥物動力學(xué)研究。
　　 二、人尿中艾普拉唑代謝物的結(jié)構(gòu)鑒定

4、
　　 目的:利用LC-MS/MS和LC-NMR鑒定口服艾普拉唑在人尿中的四種代謝產(chǎn)物
　　 方法:尿樣在被Na2CO3溶液(1 mol/L)堿化后,加入適量二氯甲烷以及0.05 mol/L的醋酸銨緩沖溶液進行萃取。選用伊利特C18柱,流動相為甲醇:0.05MNH4AC水溶液,Agilent1200色譜系統(tǒng)進行檢測。
　　 結(jié)果:通過HPLC-MS/MS以及HPLC-NMR實驗鑒定了健康受試者服用艾普拉唑后尿液中

5、的代謝產(chǎn)物M1-M4。4個代謝產(chǎn)物均為艾普拉唑的醚化產(chǎn)物,艾普拉唑硫醚,12-羥基艾普拉唑硫醚,11,12-二羥基硫醚和艾普拉唑硫醚A。由此,我們推斷4個代謝產(chǎn)物的代謝途徑為:艾普拉唑首先被代謝酶還原成艾普拉唑硫醚(M1),艾普拉唑硫醚(M1)接著被還原成艾普拉唑硫醚A(M4)以及發(fā)生羥基化反應(yīng)生成12-羥基艾普拉唑硫醚(M2),12-羥基艾普拉唑硫醚(M2)再次發(fā)生羥基化反應(yīng)生成11,12-二羥基艾普拉唑硫醚(M3)。此外,在尿液中未

6、檢測到原料藥、砜化產(chǎn)物以及去甲基化和羥基化的產(chǎn)物。
　　 三、在中國健康人中研究新型質(zhì)子泵抑制劑艾普拉唑與CYP3A5和CYP2C19基因型相關(guān)的藥代動力學(xué)
　　 目的:本試驗是研究新型質(zhì)子泵抑制劑艾普拉唑在健康中國受試者中的藥代動力學(xué)以及和代謝酶CYP3A5和CYP2C19的基因多態(tài)性。
　　 方法:在202名健康中國受試者中篩選CYP3A5*3基因型,根據(jù)他們的CYP3A5和CYP2C19基因型有21名成年男

7、子入選參加本實驗。
　　 在服用單劑量艾普拉唑后利用LC-MS/MS檢測艾普拉唑和代謝產(chǎn)物在血漿中的血藥濃度。
　　 結(jié)果:在CYP2C19野生純合子及突變雜合子中即所有的受試者中,艾普拉唑和艾普拉唑砜的主要代謝參數(shù)在3組CYP3A5基因型中顯著變化。雖然CYP3A5高表達(CYP3A5*1/*1)顯示比低表達(CYP3A5*1/*3)較高的清除率,但是無表達(CYP3A5*3/*3)在3組不同基因型中有最高的清除率。根

8、據(jù)這一結(jié)果,可以認為CYP3A5*1/*1、CYP3A5*1/*3、CYP3A5*3/*3,代謝艾普拉唑的能力分別為中、低、高。這一結(jié)果提示我們CYP3A5酶活性與艾普拉唑的代謝無關(guān)。假如在3組基因型中,CYP3A5基因型-表型與總CYP3A酶活性沒有我們預(yù)期的相關(guān)性,我們就不能用CYP3A5基因型代表總的CYP3A活性。
　　 結(jié)論：本試驗沒有發(fā)現(xiàn)CYP3A5于艾普拉唑的代謝有相關(guān)性。
　　 四、抗幽門螺桿菌三聯(lián)用藥方

9、案對艾普拉唑藥物代謝動力學(xué)的影響
　　 目的:三聯(lián)用藥方案中多劑量艾普拉唑和非聯(lián)用方案中多劑量艾普拉唑藥代動力學(xué)參數(shù)差異的研究
　　 方法:本研究為自身前后對照、雙周期、雙交叉實驗。第一階段連續(xù)服用艾普拉唑5 mg Bid×6天。第一天和第七天抽取服藥后0,0.5,1,1.5,2,3,4,6,8,12,24,48和72小時的5 ml血樣(采用靜脈留滯針)和收集服藥后0-24小時分段尿。一周洗脫期后開始第二階段連續(xù)服用克拉

10、霉素500 mg Bid+可莫西林1g:Bid+消旋艾普拉唑5 mg Bid三聯(lián)用藥×6天。抽取相同時間點8 ml血樣(采用靜脈留滯針)。兩組受試者經(jīng)洗脫期后交換服藥方式,采集相應(yīng)時間點的血藥濃度。采用HPLC-MS/MS法測定給藥后不同時間艾普拉唑血藥濃度,利用DAS Ver2.0計算藥動學(xué)參數(shù)和進行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:三聯(lián)用藥組艾普拉唑在吸收速度和吸收量上均較單劑量艾普拉唑組降低,代謝產(chǎn)物之一艾普拉唑砜在吸收速度和吸收量