納米羥基磷灰石涂層材料對(duì)犬自體靜脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞毒性的實(shí)驗(yàn)研究與犬體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)的初步研究.pdf

1、背景:心臟瓣膜疾病是一類危及人類健康和生命的疾病,嚴(yán)重影響患者的工作和生活質(zhì)量。瓣膜置換是治療心臟瓣膜疾病的有效方法。目前應(yīng)用于臨床的主要有生物瓣膜和機(jī)械瓣膜,各有優(yōu)缺點(diǎn):生物瓣膜容易鈣化、衰敗及破損撕裂,嚴(yán)重影響實(shí)際使用壽命;機(jī)械瓣膜需終生抗凝,以防止血栓形成。因而上述兩種人工心臟瓣膜在實(shí)際臨床應(yīng)用中均受到了一定的限制。理想的人工心臟瓣膜應(yīng)該是既有良好的使用壽命,又有很好的組織相容性,不會(huì)或者極少產(chǎn)生血栓。隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,運(yùn)用

2、組織工程學(xué)原理構(gòu)建的組織工程心臟瓣膜的研究便應(yīng)運(yùn)而生,理論上能克服生物瓣與機(jī)械瓣膜的不足之處,而且有良好的自我修復(fù)、重建能力等優(yōu)點(diǎn),可成為理想的瓣膜,所以具有廣闊的臨床應(yīng)用前景,也是目前組織工程化人工心臟瓣膜的研究熱點(diǎn)。
　　目的:體外培養(yǎng)法檢測(cè)納米羥基磷灰石材料涂層(nano-hydroxyapatite,NHA)對(duì)犬自體靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞毒性,并種植與自體犬內(nèi)觀察其表面內(nèi)皮化情況,為運(yùn)用組織工程學(xué)原理構(gòu)建的組織工程瓣膜提供理想

3、的支架材料。
　　方法:第一部分:將獲取的犬自體大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),取傳代培養(yǎng)細(xì)胞其中一部分行免疫熒光檢測(cè);將剩余部分分為兩組,一組與納米羥基磷灰石涂層材料體外復(fù)合培養(yǎng),另外一組不加材料單獨(dú)接種培養(yǎng)作為對(duì)照組。分別收集第1,3,5,7天培養(yǎng)液,ELISA法檢測(cè)PGI2含量,以了解NHA材料對(duì)犬自體靜脈內(nèi)皮細(xì)胞有無(wú)細(xì)胞毒性。第二部分:將納米羥基磷灰石涂層材料,人工機(jī)械瓣膜瓣葉材料分別植入犬右心房,掃描電鏡觀察了解材料表面內(nèi)

4、皮細(xì)胞化情況。
　　結(jié)果:(1)獲取自犬大隱靜脈血管內(nèi)壁的細(xì)胞傳代培養(yǎng)后經(jīng)免疫熒光檢測(cè)為血管內(nèi)皮細(xì)胞;其在納米羥基磷灰石涂層材料表面生長(zhǎng)、粘附、增殖狀況良好,檢測(cè)PGI2的含量與空白對(duì)照組無(wú)明顯差異性(P>0.05)。(2)納米羥基磷灰石涂層材料植入右心房八周后,取出沖洗干凈,掃描電鏡觀察其表面形成內(nèi)皮樣細(xì)胞;人工機(jī)械瓣膜瓣葉材料表面未見內(nèi)皮細(xì)胞形成,見少量血栓附著。
　　結(jié)論:納米羥基磷灰石涂層材料對(duì)犬自體大隱靜脈血管內(nèi)皮