自體骨膜細(xì)胞移植修復(fù)Beagle犬Ⅲ度根分叉病變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分：兩種培養(yǎng)基對(duì)狗骨膜細(xì)胞生物學(xué)行為的影響 目的： 研究不同培養(yǎng)基對(duì)Beagle犬骨膜細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，為牙周組織工程中種子細(xì)胞的培養(yǎng)尋找合適的培養(yǎng)基。 方法： 取成年Beagle犬頜骨骨膜塊，分別用兩種培養(yǎng)基(DMEM和RPMI1640)對(duì)其組織塊進(jìn)行培養(yǎng)，觀察其細(xì)胞游出率、傳代后細(xì)胞增殖能力、堿性磷酸酶活性和礦化結(jié)節(jié)形成能力。分析兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果，比較其對(duì)體外培養(yǎng)的骨膜細(xì)胞影響。

2、結(jié)果： DMEM培養(yǎng)組組織塊細(xì)胞游出率、傳代細(xì)胞增殖能力、堿性磷酸酶活性和礦化結(jié)節(jié)形成能力均高于RPMI1640組。 結(jié)論： 在DMEM和RPMI1640兩種培養(yǎng)基中，DMEM培養(yǎng)基更適合骨膜細(xì)胞的增殖和成骨分化。 第二部分：磷酸三鈣陶瓷對(duì)狗骨膜細(xì)胞生物學(xué)行為的影響 目的： 檢測(cè)B一磷酸三鈣陶瓷(β -TCP)對(duì)骨膜細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化特點(diǎn)的影響，探討β-TCP作為牙周組織工程支架材料的可

3、行性。 方法： 組織塊法培養(yǎng)的骨膜細(xì)胞經(jīng)傳代培養(yǎng)后，接種于β－TCP上培養(yǎng)。通過(guò)MTT、流式細(xì)胞術(shù)和堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)骨膜細(xì)胞的增殖和成骨分化情況，并通過(guò)掃描電鏡觀察細(xì)胞在材料表面生長(zhǎng)情況。 結(jié)果： 骨膜細(xì)胞與β－TCP共培養(yǎng)后，仍能維持其增殖能力，在材料表面貼附生長(zhǎng)良好，并保持其成骨分化潛能。 結(jié)論： β－TCP適合骨膜細(xì)胞生長(zhǎng)和成骨分化，適合作為牙周組織工程的支架材料。 第三

4、部分：骨膜細(xì)胞移植修復(fù)Beagle犬Ⅲ度根分叉病變的實(shí)驗(yàn)研究 目的： 應(yīng)用自體骨膜細(xì)胞移植并結(jié)合膨體聚四氟乙烯(e-PTFE)膜引導(dǎo)牙周組織再生術(shù)(GTR)修復(fù)Beagle犬Ⅲ度根分叉病變，探討其用于牙周組織再生的可行性。 方法： 人工構(gòu)建4只成年Beagle犬慢性Ⅲ度根分叉病變模型，將24顆受試牙隨機(jī)分成三組，A組：e-PTFE＋β－TCP+骨膜細(xì)胞；B組：e-PTFE+β-TCP；C組：e-PTFE，

5、即單純GTR組。每組8顆牙，治療期間不采用任何口腔衛(wèi)生措施。術(shù)后12周取下頜骨標(biāo)本，因各組各有2顆牙在造模過(guò)程或治療過(guò)程中出現(xiàn)根分叉穿孔或牙齦嚴(yán)重退縮，最終各組有6顆牙作組織學(xué)分析，蘇木精-伊紅(HE)染色和Mallory三色法觀察牙周組織再生情況。 結(jié)果： 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)C組的新生牙骨質(zhì)和牙周膜的長(zhǎng)度分別為3.37±1.21mm和1.33±0.31mm，分別占總?cè)睋p長(zhǎng)度的31.67％±12.83％和17.70％±5.35

6、％，牙槽骨生成的面積為2.35±1.26 mm2，占總?cè)睋p面積的22.62％±7.33％；B組的新生牙骨質(zhì)和牙周膜的長(zhǎng)度分別為4.71±1 47 mm和2.34±0.47mm，分別占總?cè)睋p長(zhǎng)度的43.02％±8.08％和22.18％±5.19％，牙槽骨生成的面積為3.71±2.00mm2，占總?cè)睋p面積的34.77％±15.38％;A組的新生牙骨質(zhì)和牙周膜的長(zhǎng)度分別為5.53±1.34mm和3.71±1.82mm，分別占總?cè)睋p長(zhǎng)度的50.

7、77％±8.19％和33.64％±13.83％，牙槽骨生成的面積為6.21±2.18mm2，占總?cè)睋p面積的60.23％±18.16％。A組的牙周膜的長(zhǎng)度、新生牙槽骨面積及各自在總?cè)睋p長(zhǎng)度或面積中所占的比例與C組和B組比較，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05)。同時(shí)，A組的新生牙骨質(zhì)長(zhǎng)度及在總?cè)睋p長(zhǎng)度中所占的比例與C組比較，其差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論： 應(yīng)用自體骨膜細(xì)胞移植結(jié)合引導(dǎo)牙周組織再生術(shù)有望