滇桑、蠶沙化學(xué)成分及生物活性的研究.pdf

1、滇桑為?？芃oraceae，桑屬M(fèi)orus植物，分布于云南西北。桑屬植物化學(xué)成分及生物活性研究均較為豐富，脂溶性部分以酚性化合物為主，生物活性主要集中在抗高血壓，抗病毒，抗菌，抗氧化，抗炎，抗腫瘤等；水溶性部分以多羥基生物堿和氨基酸為主，多羥基生物堿主要具有降血糖活性。蠶沙為昆蟲家蠶蛾Bobyx moriL幼蟲的干燥糞便，記載于《本草綱目》。蠶沙有祛風(fēng)除濕、清熱明目、活血定痛的功能。主治風(fēng)熱目痛、風(fēng)濕性心臟病、關(guān)節(jié)炎、肢體麻木、風(fēng)疹瘙癢

2、、頭痛頭風(fēng)等癥，在一些治療糖尿病的復(fù)方中經(jīng)常使用。蠶沙60％乙醇提取物有效部位經(jīng)我所藥理室篩選，表明具有較強(qiáng)抑制α-葡萄糖苷酶活性。 本論文運(yùn)用色譜和波譜技術(shù)并結(jié)合化學(xué)方法，以生物活性為指標(biāo)，對上述中藥蠶沙及滇桑莖皮進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，并對其粗提物及單體成分進(jìn)行了藥理活性篩選。 從滇桑Morus yunnanensis Koidz莖皮95％乙醇提取物乙酸乙酯及氯仿洗脫部分共得到47個化合物。這些化合物分別為Yuna

3、nenso1A(1)，Yunanenso1 B(2)，Yunanensin B(3)，Yunanensin A(4)，Yunanensin C(5)，Yunanensin D(6)，YunanensinE(7)，Kuwanon H(8)，Kuwanon G(9)，Kuwanon O(10)，Sanggeno1 M(11)，Mongolicin F(12)，Guangsangon J(13)，Mulberrofuran J(14)，Gua

4、ngsangon B(15)，Guangsangon L(16)，Kuwanon X(17)，Kuwanon P(18)，Mulberrofuran E(19)，Mulberrofuran O(20)，Chalcomoracin (21)，Mulberrofuran K(22)，Sorocein A(23)，Mulberrofuran F(24)，Kuwanol A(25)，Albano1 B(26)，Mulberrofuran Q(2

5、7)，Mongolicin C(28)，Moracin P(29)，Moracin M(30)，Mulberroside C(31)，AustrafuranC(32)，3'，5'，2，4-tetrahydroxy-4-(3-methyl-l butenyl)Stibene(33)，Resveratrol(34)，Oxyresveratrol(35)，Morachalcone A(36)，2'，4'，7-trihydroxy-(2S)-f

6、lavone(37)，5，7，2'，4'-tetrahydroxy-3-gerany flavone(38)，Norartocarpetin(39)，Isolicoflavonol(40)，Kaempferol(41)，Sitosteryl 3β-glucoside 6'-O-palmitate(42)，正丁酸(n-butanoicacid，43)，β-daucosterol(44)，β-sitosterol(45)，Betulinic

7、 acid(46)，Lupeol(47)。在這些化合物中，Dids-Alder型加合物26個(3-28)，二苯乙烯和苯駢呋喃類化合物7個(29-35)，黃酮類化合物8個(1，2，36-41)，三萜類化合物(46，47)2個及其他化合物4個(42-45)。其中，化合物1，2為新黃酮類化合物，化合物3-7為新Diels-Alder型化合物。所有47個分離得到的化合物均為首次從滇桑中得到。從蠶沙(Faeces bombycis)60％乙醇提取

8、物、95％乙醇提取物共得到29個化合物。這些化合物分別為Scopoletin(1)，Umbelliferone(2)，Esculetin(3)，二氫尿嘧啶(Dihydro uracil，4)，尿嘧啶(Uracil，5)，(6S,9R)-Vomifoliol(6)，(6S,9S)-Vomifoliol(7)，Loliolide(8)，苯甲酸(Benzoic acid，9)，9，16-Dioxo-10，12，14-octadecatrien

9、oic acid(10)，1-doexynojirimycin(11)，F(xiàn)agomine(12)，丙氨酸(Alanine，13)，谷氨酸(Glutamic acid，14)，甜菜堿(Betaine，15)，異亮氨酸(Isoleucine，16)，亮氨酸(Leucine，17)，苯丙氨酸(Phenylalanine，18)，L-哌可啉酸(L-pipecolinic acid，19)，3s,5R-dihydroxy-6R，7-megstig

10、madien-9-one(20)，3s,5R-dihydroxy-6s,7-megstigmadien-9-one(21)，(6R，9R)-3-Oxo-α-ionolβ-D-glucopyranoside(22)，(6R，9S)-3-Oxo-α-ionol β-D-glucopyranoside(23)，BlumenolC glucoside(24)，Byzantionoside B(25)，Alangionoside L(26)，葉黃

11、素(Lutein，27)，β-sitosterol(28)，β-daucosterol(29)。在這些化合物中，香豆素類化合物3個(1-3)，降倍半萜及其苷類化合物10個(6-8，20-26)，多羥基生物堿化合物2個(11，12)，氨基酸類化合物5個(13，14，16-18)，含N類其它化合物4個(4，5，15，19)及其他化合物5個(9，10，16-18)。 在分離得到的化合物中，有21個為首次從蠶沙中得到，分別為化合物1-1

12、2，15，20-17。藥理篩選結(jié)果： (1)滇桑莖皮95％乙醇提取物及從中分離得到的單體化合物的活性。 ①抗腫瘤活性：采用MTT法，滇桑莖皮95％乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯部分對五種人癌細(xì)胞(A549，人肺腺癌細(xì)胞；Bel-7402，人肝癌細(xì)胞；BGC-823，人胃癌細(xì)胞；HCT-8，人結(jié)腸癌細(xì)胞；A2780，人卵巢癌細(xì)胞)表現(xiàn)弱的抗腫瘤活性；20個單體化合物(包括1個新Diels-Alder型加合物)，其中8個Diel

13、s-Alder型加合物和1個三萜酸對五種癌細(xì)胞都具有抑制作用；另外4個Diels-Alder型加合物，4個二苯乙烯和苯駢呋喃類化合物及3個黃酮類化合物顯示對部分人癌細(xì)胞的抑制作用，IC50在0.092到9.806μg/mL之間。 ②抗氧化活性：滇桑莖皮95％乙醇提取物的乙酸乙酯部分顯示明顯的抗氧化活性；從滇桑乙酸乙酯部分得到的23個酚性成分顯示抗氧化活性：其中Diels-Alder型加合物19個(包括4個新化合物)，二苯乙烯和苯

14、駢呋喃類化合物3個及1個黃酮類化合物對Fe2+-半胱氨酸誘導(dǎo)的肝微粒體脂質(zhì)過氧化物的抑制率均大于50％，其中10個化合物的抑制率達(dá)到90％以上。 ③抗炎活性：10個化合物對PAF刺激的多形核白細(xì)胞β葡萄糖苷酸酶釋放表現(xiàn)了抑制作用，顯示抗炎活性：尤其2個Diels-Alder型加合物與2個黃酮類化合物(包括1個新黃酮類化合物)的抑制率均在90％以上。 (2)蠶沙化合物的抑制α-葡萄糖苷酶活性通過以體外抑制α-葡萄糖苷酶為指

15、標(biāo)，對蠶沙60％乙醇提取物的分離過程進(jìn)行活性追蹤，從中發(fā)現(xiàn)了2個單體化合物具有較好的降糖活性，為多羥基生物堿類化合物，化合物1-doexynojirimycin與Fagomine，抑制α-葡萄糖苷酶IC50分別為0.014and 1.368μg/mL；對它們進(jìn)一步進(jìn)行α-麥芽糖酶、α-蔗糖酶、α-淀粉酶抑制活性的測定；并積累了足夠量，進(jìn)行小鼠體內(nèi)抗糖尿病活性作用機(jī)理的研究，分別進(jìn)行正常小鼠蔗糖負(fù)荷、正常小鼠淀粉負(fù)荷、正常小鼠葡萄糖負(fù)荷、