丹芩婦炎顆粒中丹參酮ⅡA和黃芩苷的含量測定與抗炎作用的研究.pdf

1、目的：研究丹芩婦炎顆粒中丹參酮ⅡA、黃芩苷的含量測定方法；丹芩婦炎顆粒的抗炎作用及其機(jī)制。
　　 方法：1.含量測定采用HPLC測定丹芩婦炎顆粒中丹參酮ⅡA、黃芩苷的含量。
　　 2.抗炎作用
　　 2.1對大鼠腹腔粘連模型的影響：將大鼠麻醉，無菌操作下，在回盲部右側(cè)面用什錦銼刀反復(fù)磨擦漿膜層至表面針尖狀出血點(diǎn)，形成約5cm×4cm的受損創(chuàng)面后還納腹腔，縫合皮膚。連續(xù)給予丹芩婦炎顆粒20天后處死動(dòng)物，剖腹，觀察回

2、盲部粘連情況。
　　 2.2對大鼠實(shí)驗(yàn)性慢性盆腔炎模型的影響：將雌性大鼠麻醉，無菌操作下于一側(cè)子宮注入0.2ml大腸桿菌懸液，在注入菌液之前用注射器機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜，然后注入0.1ml菌液，分層關(guān)腹。造模后第10天給予丹芩婦炎顆粒，連續(xù)20天。處死動(dòng)物，取左側(cè)子宮，觀察外觀形態(tài)變化，用10％甲醛固定，切片。HE染色進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，另采用免疫組化測定子宮組織中TNF-α、IL-2。
　　 結(jié)果：1.含量測定
　　

3、 1.1丹參酮ⅡA的含量測定
　　 色譜柱：C18柱(250mm×4.6mm)，柱溫：30℃，檢測波長：270nm，流動(dòng)相：乙腈-水(73：27)，流速：1.0ml/min。丹參酮ⅡA在0.046ug～0.368ug范圍內(nèi)，峰面積值與濃度呈良好的線性關(guān)系；平均回收率為98.1％，RSD為2.17％。規(guī)定：丹芩婦炎顆粒每袋(9g裝)含丹參酮ⅡA應(yīng)不低于4.74mg。
　　 1.2黃芩苷的含量測定
　　 色譜柱：C

4、18柱(250mm×4.6mm)，柱溫：30℃，檢測波長：280nm，流動(dòng)相：甲醇-0.1％磷酸(55：45)，流速：1.0ml/min。黃芩苷在0.15ug～1.2ug范圍內(nèi)，峰面積值與濃度呈良好的線性關(guān)系；平均回收率為100.717％，RSD為1.252％。規(guī)定：丹芩婦炎顆粒每袋含黃芩苷應(yīng)不低于256.611mg。
　　 2.抗炎作目
　　 2.1對火鼠腹腔粘連模型的影響：
　　 丹芩婦炎顆粒模型組評分值和假

5、手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.01)；高劑量組、千金片組評分值與模型組比較，有顯著性差異(P＜0.01)；中劑量組評分值與模型組比較有差異(P＜0.05)；而丹芩婦炎顆粒低劑量與模型組比較，無差異(P＞0.05)。
　　 2.2對大鼠實(shí)驗(yàn)性慢性盆腔炎模型的影響
　　 2.2.1子宮外觀形態(tài)觀察：丹芩婦炎顆粒模型組和假手術(shù)組相比有充血、炎性腫脹、腹腔內(nèi)有明顯纖維組織粘連；高劑量組和千金片組可以明顯減輕組織粘連和充血癥狀；

6、低、中劑量可以輕度減輕粘連和充血癥狀。
　　 1.2.2病理學(xué)觀察：
　　 丹芩婦炎顆粒模模型組和假手術(shù)組相比有明顯結(jié)締組織增生和炎細(xì)胞浸潤；高劑量組和千金片組減少淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤、組織增生；低、中劑量可輕度減輕漿細(xì)胞浸潤。
　　 1.2.3TNF-α表達(dá)：丹芩婦炎顆粒模型組評分值與假手術(shù)組比較，有顯著性差異(P＜0.01)；高劑量組、千金片組評分值與模型組比較，有顯著性差異(P＜0.01)；而丹芩婦炎顆粒低

7、、中劑量評分值與模型組比較，無差異(P＞0.05)。
　　 1.2.4IL-2表達(dá)：丹芩婦炎顆粒模型組評分值與假手術(shù)組比較，有顯著性差異(P＜0.01)；高劑量組、千金片組評分值與模型組比較，有顯著性差異(P＜0.01)；而丹芩婦炎顆粒低、中劑量評分值與模型組比較，無差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：丹芩婦炎顆粒中丹參酮ⅡA、黃芩苷采用高效液相色譜法，線性和回收率良好，可作為質(zhì)量控制方法。丹芩婦炎顆粒可以降低炎癥增生和