隱丹參酮、丹參酮Ⅱ-A的抗炎癥及抗癌癥作用機(jī)制.pdf

1、丹參(Salvia miltiorrhiza Bge)是我國(guó)傳統(tǒng)中藥中的重要一員。早在兩千年前人們就將丹參用于祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩等方面。丹參的主要成分有丹參酮Ⅰ、ⅡA、ⅡB（tanshinoneⅠ、ⅡA、ⅡB）異丹參酮Ⅰ、ⅡA（isotanshinoneⅠ、ⅡA）、隱丹參酮（cryptotanshinone）、異隱丹參酮（isocryptotanshin-one）、甲基丹參酮（methyItanshinone）、羥基丹參酮。丹

2、參及丹參酮類物質(zhì)作為活血、保心、抗炎等藥物在臨床已經(jīng)使用多年，但是對(duì)其抗炎癥、癌癥的作用靶點(diǎn)及機(jī)理還不清晰。我們?cè)谛∈缶奘杉?xì)胞系RAW264.7和人肝癌細(xì)胞系Hep G2中，通過(guò)使用半定量RT-PCR、Western Blot、ELISA、MTT 比色法等方法研究丹參抗炎癥、癌癥分子作用機(jī)理，發(fā)現(xiàn)其能夠通過(guò)抑制磷脂酶A2酶活及轉(zhuǎn)錄，抑制Bcl-2蛋白，從而實(shí)現(xiàn)其抗炎癥、癌癥目的。 首先，使用隱丹參酮刺激經(jīng)LPS處理的巨噬細(xì)胞RA

3、W264.7細(xì)胞，通過(guò)半定量RT-PCR、Western Blot、HPLC等方法研究隱丹參酮對(duì)花生四烯酸代謝途徑中關(guān)鍵酶—PLA2、COX-2。我們發(fā)現(xiàn)隱丹參酮在轉(zhuǎn)錄水平和酶活水平上均能有效地抑制cPLA2；COX-2在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上卻都沒(méi)有受到隱丹參酮的抑制。 其次，在RAW264.7細(xì)胞中以同樣的方法檢測(cè)炎癥相關(guān)因子—IL-6和IL-10的變化。結(jié)果顯示，隱丹參酮在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上能有效地抑制IL-6，同時(shí)也能有效地提高

4、IL-10的含量。隱丹參酮對(duì)IL-6和IL-10的影響是專一性的，是在炎性的條件下的特異作用。 最后，在人肝癌細(xì)胞Hep G2細(xì)胞中研究了丹參酮Ⅱ-A的抗癌癥機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，丹參酮Ⅱ-A能通過(guò)抑制Bcl-2蛋白來(lái)激發(fā)Hep G2細(xì)胞的凋亡途徑來(lái)達(dá)到抑制Hep G2的效果，其抑制作用與丹參酮Ⅱ-A濃度成正比。隱丹參酮的半抑制濃度：IC50＝94.6μM；半定量RT-PCR顯示丹參酮Ⅱ-A能通過(guò)抑制凋亡相關(guān)基因——Bcl-2來(lái)實(shí)