適于玉米DNA指紋庫構(gòu)建的多重PCR擴(kuò)增體系的建立與研究.pdf

1、玉米品種DNA指紋數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建在玉米品種純度及真實(shí)性鑒定、品種權(quán)登記保護(hù)、區(qū)試及審定品種質(zhì)量監(jiān)控等方面具有重要應(yīng)用價(jià)值，對(duì)理清我國玉米種質(zhì)的血緣關(guān)系、雜種優(yōu)勢群劃分、種質(zhì)創(chuàng)新及新品種選育具有重要指導(dǎo)意義。本論文以SSR標(biāo)記為技術(shù)手段，對(duì)新設(shè)計(jì)引物的實(shí)驗(yàn)室篩選，多重PCR組合建立的基本過程、普通多重PCR及熒光多重PCR組合的確定等玉米DNA指紋庫構(gòu)建的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行了研究。 本論文形成如下研究結(jié)果： (1) 利用引物設(shè)

2、計(jì)軟件對(duì)入選引物位點(diǎn)進(jìn)行重新優(yōu)化設(shè)計(jì)，并對(duì)新設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室篩選，216對(duì)新設(shè)計(jì)的SSR．引物有76對(duì)出現(xiàn)擴(kuò)增失敗或帶型較弱的現(xiàn)象，其余140對(duì)SSR引物擴(kuò)增效果較好，可以入選為組多重的候選引物。 (2) 對(duì)入選的引物進(jìn)行多重PCR組合，探討了多重PCR構(gòu)建的基本過程，分析了多重PCR組合建立的主要影響因素，并提出了構(gòu)建多重PCR組合應(yīng)該遵循的重要原則。 (3) 按照相似的過程，根據(jù)每套10個(gè)引物(每條染色體1個(gè))的