適于玉米DNA指紋庫構建的多重PCR擴增體系的建立與研究.pdf

1、玉米品種DNA指紋數據庫的構建在玉米品種純度及真實性鑒定、品種權登記保護、區(qū)試及審定品種質量監(jiān)控等方面具有重要應用價值，對理清我國玉米種質的血緣關系、雜種優(yōu)勢群劃分、種質創(chuàng)新及新品種選育具有重要指導意義。本論文以SSR標記為技術手段，對新設計引物的實驗室篩選，多重PCR組合建立的基本過程、普通多重PCR及熒光多重PCR組合的確定等玉米DNA指紋庫構建的關鍵技術環(huán)節(jié)進行了研究。 本論文形成如下研究結果： (1) 利用引物設

2、計軟件對入選引物位點進行重新優(yōu)化設計，并對新設計的引物進行實驗室篩選，216對新設計的SSR．引物有76對出現擴增失敗或帶型較弱的現象，其余140對SSR引物擴增效果較好，可以入選為組多重的候選引物。 (2) 對入選的引物進行多重PCR組合，探討了多重PCR構建的基本過程，分析了多重PCR組合建立的主要影響因素，并提出了構建多重PCR組合應該遵循的重要原則。 (3) 按照相似的過程，根據每套10個引物(每條染色體1個)的