CD147在親環(huán)素A誘導Jurkat細胞增殖、活化和趨化過程中的作用.pdf

1、目的: 研究CD147分子在親環(huán)素A(CyPA)誘導的人T系白血病細胞株Jurkat細胞增殖、活化和趨化過程中的作用，旨在明確CyPA在Jurkat細胞中可能的作用及機制，并探討CyPA和CD147分子的相互作用對腫瘤細胞生物學行為的影響。 方法: 1.采用RT-PCR法檢測轉染CD147siRNA的Jurkat細胞(已構建)CD147 mRNA水平，證實轉染的有效性； 2.以不同濃度CyPA(0.01n

2、M，0.1nM，1nM，10nM)處理Jurkat細胞24 h和48 h，采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測CyPA的促細胞增殖作用；以最佳CyPA作用濃度處理Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD147siRNA細胞，檢測CD147siRNA轉染對CyPA促細胞增殖的影響； 3.以10nM CyPA處理Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD 147siRNA細胞24 h，采用流式細胞

3、儀法檢測CyPA處理前后細胞表面活化標記分子CD25的表達； 4.采用Transwell小室法檢測CyPA趨化Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD147siRNA細胞的能力； 結果: 1.CD147siRNA轉染有效，Jurkat-CD147siRNA細胞的CD147mRNA表達水平較Jurkat細胞顯著下降，抑制率為67.12％(P<0.05)； 2.CyPA以濃度依賴性方式促進

4、Jurkat細胞增殖，CyPA濃度為0.1nM時開始促細胞增殖，10nM時促增殖作用最強；CD147siRNA轉染導致CyPA促細胞增殖作用顯著下降，以Jurkat+CyPA組為對照，Jurkat-CD147siRNA+CyPA組在24 h和48 h時的增殖抑制率分別為38％和27％，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)； 3.CyPA可促進Jurkat細胞的活化，CyPA處理前后的CD25陽性表達率分別為6.28％和7.75％(

5、P<0.05)；CD147siRNA轉染致CyPA促細胞活化能力下降，Jurkat-CD147siRNA+CvPA組和Jurkat+CyPA組的CD25陽性表達率分別為3.51％和7.75％，有顯著性差異(P<0.05)； 4.CyPA對Jurkat細胞有趨化作用，CyPA趨化組與對照組趨化細胞數分別為67611±4148和29056±3643，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；CyPA趨化Jurkat-CD147siRNA的細