腦脊液病原體檢測芯片技術(shù)平臺的建立及其應(yīng)用.pdf

1、　　目前，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)感染的病原體診斷仍然靠形態(tài)學(xué)檢查、腦脊液病原體培養(yǎng)以及免疫學(xué)的方法，這些方法缺乏敏感性、特異性，而且費(fèi)時(shí)費(fèi)力，尤其是一些難以進(jìn)行培養(yǎng)的病原體感染，更難檢測和確診。由于不同的病原體有不同的治療方案，及時(shí)準(zhǔn)確的診斷才能進(jìn)行成功的治療，而早期治療能降低并發(fā)癥和死亡率，因此，建立一種早期平行快速診斷方法至關(guān)重要。建立在分子生物學(xué)和生物信息學(xué)基礎(chǔ)上的生物芯片技術(shù)，以其高度并行性、多樣性、微型化和自動化的突出特點(diǎn)，在

2、病原體的分型、鑒定、耐藥性檢測及特異性抗體檢測等方面進(jìn)行了多種研究，顯示出了非常廣闊的應(yīng)用前景，使建立一種早期平行快速的診斷方法成為可能。
　　研究目的：分別以帶正電荷的尼龍膜和玻片為基片，建立兩套微陣列芯片檢測系統(tǒng)，包括檢測病原菌靶基因的寡核苷酸微陣列和檢測病原體抗體的抗原微陣列。
　　研究方法：
　　1.腦脊液病原菌寡核苷酸微陣列技術(shù)平臺的建立及其應(yīng)用
　　(1)寡核苷酸微陣列的設(shè)計(jì)
　　首先確定腦脊液

3、常見病原菌的種類，選擇以下細(xì)菌作為研究的對象：醋酸鈣不動桿菌、脆弱類桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌、大腸桿菌、腸球菌、腦膜炎敗血性黃桿菌、壞死梭桿菌、流感嗜血桿菌、單核細(xì)胞增生性李斯特菌、卡他莫拉氏菌、結(jié)核分枝桿菌、腦膜炎奈瑟氏球菌、消化鏈球菌、巴斯德菌、變形桿菌、假單胞菌屬、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、無乳鏈球菌、沙門氏菌屬、肺炎鏈球菌等。通過網(wǎng)絡(luò)檢索查找這些細(xì)菌的基因序列，確定選擇16S rRNA基因?yàn)樗芯康陌谢?，并下載檢索到這些細(xì)菌