基于酵母的高靈敏度抗朊病毒藥物篩選模型的建立及應(yīng)用研究.pdf

1、　　哺乳動(dòng)物的一系列致死性的傳染性海綿樣腦病都是由朊病毒引起的。遺憾的是，迄今為止對(duì)朊病毒疾病的治療仍然沒(méi)有有效的治療藥物和治療方法，尋找有效的治療朊病毒疾病的藥物與治療方法一直是國(guó)內(nèi)外生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)?；诮湍傅目闺貌《舅幬锖Y選模型是近年來(lái)建立的一種被證明有效、安全、快速的抗朊病毒候選藥物篩選模型，其利用野生型酵母朊病毒的表型變化篩選抗朊病毒候選藥物，由于野生型酵母對(duì)藥物的敏感性較差，因而易造成某些溫和型藥物的漏篩。

2、>　　本研究旨在建立高靈敏度抗朊病毒候選藥物篩選模型篩選具有抗朊病毒活性的中藥提取物。首先，通過(guò)比較NGMC、SSA1-21、SSBΔ、ERG6Δ和野生型酵母朊病毒在表型、生長(zhǎng)特性和對(duì)抗朊病毒藥物的敏感性差異，確定了利用ERG6Δ酵母朊病毒來(lái)篩選具有抗朊病毒活性的中藥提取物。
　　其次，利用ERG6Δ藥物敏感型酵母朊病毒通過(guò)液體治愈法對(duì)28種中藥提取物進(jìn)行了初步篩選，研究發(fā)現(xiàn)白芨、五味子和白術(shù)三種中藥提取物具有不同程度的抗酵母朊

3、病毒活性。
　　最后，利用表型分析方法和蛋白水平的半變性瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)結(jié)合免疫印記方法定量分析了白術(shù)提取物的抗朊病毒效果，研究結(jié)果表明：白術(shù)提取物含量為15 mg/ml時(shí)，作用ERG6Δ酵母朊病毒五天后的初步治愈率達(dá)到了90.2%，更進(jìn)一步的表型方法分析和蛋白水平的檢測(cè)結(jié)果證實(shí)白術(shù)提取物對(duì)ERG6Δ酵母朊病毒具有明顯的治愈作用。
　　綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本研究初步得出結(jié)論：ERG6Δ 藥物敏感型酵母朊病毒適合于規(guī)?；Y