抗豬圓環(huán)病毒藥物體外篩選研究.pdf

1、豬圓環(huán)病毒感染是由豬圓環(huán)病毒引起的一種傳染病,豬圓環(huán)病毒感染疾病遍及世界各個養(yǎng)豬國家和地區(qū),已然成為嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病。雖然有報道豬圓環(huán)病毒疫苗研制成功,但是由于上市的時間不長,在臨床上使用還不廣泛,而且疫苗的效果也有待觀察,因此在臨床上豬圓環(huán)病毒病主要采取藥物治療,但臨床用藥混亂,療效不確切,迫切需要篩選高效防治藥物。本研究對臨床上常用的抗病毒藥物金剛烷胺、利巴韋林、鹽酸阿比朵爾、黃連、金銀花、連翹、板藍(lán)根對豬圓環(huán)病毒的活性抑

2、制作用進(jìn)行了檢測,以期篩選出高效藥物,為臨床防治該病提供選藥依據(jù)。
　　 MTT染色法能定量檢測細(xì)胞的增殖活性,來間接反應(yīng)藥物的抗病毒效果。為此我們將MTT作為細(xì)胞培養(yǎng)物中病毒增殖情況的指示系統(tǒng)。本研究利用。PK-15細(xì)胞建立抗豬圓環(huán)病毒藥物的篩選模型,設(shè)立正常細(xì)胞對照組。96孔板培養(yǎng)細(xì)胞24 h,細(xì)胞長成單層細(xì)胞后,每孔加入豬圓環(huán)病毒液,繼續(xù)培養(yǎng)6 h。在無毒性濃度范圍內(nèi)加入不同濃度藥物,繼續(xù)培養(yǎng)24 h,加入MTT培養(yǎng)4 h

3、,小心吸取上清液棄去,加入二甲基亞砜,37℃下孵育30 min,用酶標(biāo)儀在490 nm下測定OD值,根據(jù)公式計(jì)算病毒的抑制率和藥物的TI。
　　 中藥提取物抗豬圓環(huán)病毒活性結(jié)果:黃連的IC50為363.2μg/mL,治療指數(shù)TI為13.8,金銀花的IC50為719.7μg/mL,治療指數(shù)TI為4.1,連翹的IC50為1596.7μg/mL,治療指數(shù)TI為4.6,板藍(lán)根的IC50為1189.4μg/mL,治療指數(shù)TI為5.0,篩選

4、出了高效的抗病毒中藥藥物黃連。
　　 化學(xué)藥物抗豬圓環(huán)病毒活性的結(jié)果:利巴韋林的IC50為5.53μg/mL,治療指數(shù)TI為33.8,金剛烷胺的IC50為1.19μg/mL,治療指數(shù)TI為124.9,鹽酸阿比朵爾的IC50為6.85μg/mL,治療指數(shù)TI為33.1,篩選出了高效抗病毒藥物金剛烷胺。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)藥物對豬圓環(huán)病毒均具有抑制作用,中藥的抗病毒活性總體上要低于西藥;中藥中,黃連的抗病毒活性最高;西