肺癌患者外周血中Chemerin水平及對A549細胞信號轉導的影響.pdf

1、目的：Chemerin是近年來發(fā)現(xiàn)的一種類似于趨化因子的趨化蛋白，機體在正常狀態(tài)下由除外周血白細胞以外的各個組織產生的Chemerin是以其前體形式pro Chemerin分泌到細胞外的。Pro Chemerin活性很低，在中性粒細胞脫顆粒產生的蛋白水解酶的作用下去除碳末端的6個氨基酸后轉化為Chemerin的活性形式，活化的Chemerin能夠與其受體Chem R23結合并發(fā)揮對漿細胞樣樹突狀細胞(pDC)和巨噬細胞(M())的免疫趨

2、化作用。除免疫趨化作用外，Chemerin在脂肪細胞的合成和代謝方面也起到作用。前期研究我們通過消減雜交技術發(fā)現(xiàn)Chemerin的編碼基因TIG2是肺癌的差異表達基因，向原本不表達Chemerin的肺癌細胞系A549轉染Chemerin的重組質粒后，發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的運動能力增強。最近的研究發(fā)現(xiàn)在許多腫瘤細胞中也存在著Chemerin的分泌及ChemR23的表達，提示Chemerin—ChemR23這一通路可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展直接相關。本實

3、驗中我們將通過研究Chemerin在肺癌患者外周血中的表達以及其作用于肺癌細胞系A549后對NF—κB、JNK信號通路的影響來進一步探索Chemerin在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法：1、選取42例肺癌患者及31例健康體檢者分別作為實驗組與對照組，通過雙抗體夾心ELISA法檢測兩組實驗對象外周血中Chemerin的濃度，t檢驗比較兩組間統(tǒng)計學差異。將肺癌患者外周血中Chemerin的濃度與年齡、性別、病理類型、分化程度、淋巴結轉

4、移情況、UICC分期等臨床病理指標進行比較，應用t檢驗及單因素方差分析，得出結論。2、培養(yǎng)肺癌細胞系A549，取A549細胞分為實驗組與對照組，采用不同濃度的Chemerin(0.1、1、10nM)作用于實驗組A549細胞。將Chemerin作用后的A549細胞裂解，通過免疫印跡(western blot)法檢測實驗組與對照組中A549細胞表達的磷酸化P65、JNK蛋白濃度(分別以非磷酸化P65、GAPDH為內參)。采用單因素方差分析比

5、較各組間統(tǒng)計學差異。 結果：42例肺癌患者外周血中Chemerin的濃度與31例健康體檢者外周血中Chemerin的濃度具有顯著統(tǒng)計學差異，肺癌患者外周血中Chemerin的濃度(1773.21±328.37pg/ml)顯著高于健康體檢者(1373.72±411.62pg/ml)，p<0.001。肺癌患者外周血中Chemerin濃度與各臨床病理指標間均無統(tǒng)計學差異，各p值均大于0.05。免疫印跡結果顯示，不同濃度的Chemeri

6、n作用后，磷酸化的P65、JNK蛋白表達量(分別以P65的非磷酸化形式、GAPDH作為內參)隨著Chemerin濃度0nM、0.1nM、1nM、10nM遞增，P65的磷酸化比重增加，JNK的磷酸化程度降低。顯示Chemerin能夠濃度依賴性的導致P65的磷酸化比重增加，JNK的磷酸化程度降低。 結論：1、肺癌患者外周血中Chemerin濃度顯著高于正常人外周血中Chemerin濃度。2、肺癌患者外周血中Chemerin濃度與各臨