細胞凋亡在自發(fā)性高血壓大鼠視網(wǎng)膜微血管病變的角色研究.pdf

1、目的：研究自發(fā)性高血壓大鼠視網(wǎng)膜病變毛細血管細胞凋亡的發(fā)生，探討細胞凋亡與高血壓視網(wǎng)膜微血管病變之間的關系。 方法：10只雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)和10只雄性正常血壓大鼠(WKY)作為動物模型，自由飲水，標準飼料喂養(yǎng)，生活在晝夜節(jié)律為12小時、保持一定溫度和濕度的空間。在各組大鼠到期后(13周和18周)，臨處死前2天稱重，以0.5％戊巴比妥腹腔麻醉，經(jīng)尾套法測量血壓，并于暗室散瞳進行眼底檢查并攝片，然后處死大鼠取眼球做視網(wǎng)

2、膜消化鋪片(1)HE染色及圖像分析，動態(tài)觀測視網(wǎng)膜微血管形態(tài)的改變及測定視網(wǎng)膜毛細血管面積占每個高倍視野(HPF)面積的比值。(2)采用核苷酸末端轉移酶介導dUTP缺口翻譯法(TUNEL法)檢測視網(wǎng)膜微血管細胞凋亡變化，計數(shù)每個高倍視野(HPF)的凋亡細胞。(3)電鏡下觀察視網(wǎng)膜微血管超微結構的變化。 結果： (1)SHR組收縮壓在不同周齡均明顯高于對照WKY組(P＜0.01)，其中13局齡為(148.8±9.9)mmH

3、gvs(75.9±3.2)mmHg(P＜0.01)，18周齡為(154.4±17.9)mmHgvs(75.7±5.9)mmHg(P＜0.01)。眼底檢查采用Keith-Wagener眼底分級法分級，SHR13w和18w組眼底病變相當于高血壓眼底第Ⅰ、Ⅱ級的改變。 (2)血管鋪片HE染色顯示SHR組部分毛細血管閉塞，毛細血管細胞丟失，出現(xiàn)無細胞毛細血管，各組視網(wǎng)膜毛細血管出現(xiàn)毛細血管稀少，13w及18wSHR視網(wǎng)膜毛細血管密度較同

4、期WKY組有明顯下降(P＜0.01)。 (3)TUNEL法標記均顯示SHR各周齡出現(xiàn)陽性反應細胞，且其凋亡水平隨周齡增加并逐漸升高。WKY各組未見陽性猾亡細胞，與SHR13W組比較，SHR18w組凋亡細胞的數(shù)量增加明顯(P＜0.05)。 (4)透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)，WKY組視網(wǎng)膜微血管細胞超微結構無明顯改變，13周和18周SHR組視網(wǎng)膜微血管細胞出現(xiàn)凋亡和變性。 結論：在高血壓視網(wǎng)膜病變的進程中，存在視網(wǎng)膜微血管稀少