2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:紅芪多糖是傳統(tǒng)中藥紅芪 Hedysaym polybotrysr Hand.-Mazz.的主要藥用成分之一。隨著中藥多糖增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗腫瘤、抗輻射作用的發(fā)現(xiàn),近年來(lái),紅芪多糖也引起了愈來(lái)愈多的關(guān)注。前期的研究表明:紅芪總多糖具有抑瘤效應(yīng)和提高免疫功能的作用。由于紅芪多糖的結(jié)構(gòu)目前尚未闡明,故本研究通過(guò)對(duì)紅芪均一性多糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定、抗腫瘤作用的比較和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)理的探討,為闡明紅芪多糖抗腫瘤作用的構(gòu)效關(guān)系和作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)

2、,為挖掘潛在的抗腫瘤紅芪多糖提供試驗(yàn)依據(jù)。 方法:(1)用尺寸排阻色譜對(duì)紅芪總多糖進(jìn)行分離純化,得到3種均一性紅芪多糖。用苯酚-硫酸法、考馬斯亮藍(lán)法、HPSEC、UV等分析方法對(duì)3種多糖的總糖、蛋白、均一性及分子量等理化指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定。(2)采用化學(xué)方法,包括:多糖全水解、甲基化分析及儀器分析方法,包括:GC,GC-MS,IR,NMR,ESI-MS等對(duì)紅芪多糖HPS-1和HPS-3的一級(jí)結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行測(cè)定。(3)MTT法測(cè)定3種紅

3、芪多糖及總多糖對(duì)2種體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞增殖的影響。 (4)通過(guò)倒置顯微鏡、電鏡觀察和Hochest 33258熒光染色法觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變:流式細(xì)胞儀PI單染色法檢測(cè)細(xì)胞周期變化:流式細(xì)胞儀檢測(cè)Bcl-2、Fas和Caspase-3蛋白表達(dá)。 結(jié)果: (1)所得的3種紅芪多糖HPS-1,HPS-2和HPS-3的HPSEC譜中呈現(xiàn)單一對(duì)稱(chēng)峰,表明其均為均一性多糖。3種多糖的理化性質(zhì)有一定的差異。 (2)紅芪多

4、糖HPS-1的分子量為9.4×10<'4>Da,組成的單糖僅為α-D-Glcp;HPS-2的分子量為6.4×10<'4>Da,組成的單糖為α-D-xylp,α-D-Galp 和α-D-Glcp,摩爾比為0.14:0.16:1.00;HPS-3的分子量為 1.7×10<'4>Da,單糖的組成為α-L-Rhap,α-D-Xylp,α-D-Galp和α-D-Glcp,摩爾比為0.04:0.19:0.19:1.00。在多糖的 NMR 譜,ESI

5、-MS譜中均出現(xiàn)了以上糖殘基的特征信號(hào),IR譜中出現(xiàn)了a-Glcp的特征吸收峰。 (3)3種紅芪多糖及總多糖對(duì)體外培養(yǎng)的2種人腫瘤細(xì)胞增殖的影響具有很大差異;其中HPS-3的作用比較突出,有明顯的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用,且這種作用具有明顯的時(shí)效與量效關(guān)系。 (4)紅芪多糖HPS-3作用于MGC-803細(xì)胞后,可見(jiàn)明顯的凋亡細(xì)胞和凋亡峰,G<,2>/M期的細(xì)胞比例增高,凋亡率隨著藥物濃度的增加而加大,400μg/L 時(shí)的凋

6、亡率可達(dá)8.3±0.15%(P<0.01);隨著HPS-3濃度的增加,細(xì)胞漿中Bcl-2的表達(dá)逐漸降低,細(xì)胞中Caspase-3蛋白的表達(dá)逐漸升高;但是Fas蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化。 結(jié)論: (1) 紅芪多糖HPS-1是由(1→4)-α-D-Glcp和(1→6)-α-D-Glcp連接而成的葡聚糖;紅芪多糖HPS-3是一種主鏈由(1→6)-α-D-Glcp,(1→6)-α-D-Galp和α-D-Xylp-(1→重復(fù)片段構(gòu)成,支

7、鏈由β-D-Galp-(1→2)-α-L-Rhap殘基連接而成的水溶性雜多糖。 (2)3種紅芪多糖及總多糖具有不同的體外抗腫瘤作用,HPS-1對(duì)HEP-G2腫瘤細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用,HPS-3對(duì)MGC-803腫瘤細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用。 (3)紅芪多糖的抗腫瘤作用與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān),葡聚糖HPS-1和雜多糖HPS-3是極具潛力的抗腫瘤活性成分。 (4)HPS-3可阻滯細(xì)胞于G2/M期,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,此作用可能

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