突發(fā)事件人員救護(hù)中血液中性粒細(xì)胞快速測(cè)定方法的探討.pdf

1、目的：近年來(lái)自然災(zāi)害頻繁發(fā)生，如雪災(zāi)、地震、海嘯等給各國(guó)、各地區(qū)的人民造成了巨大的傷痛和損失。如何在這些重大災(zāi)難發(fā)生現(xiàn)場(chǎng)展開(kāi)及時(shí)有效的救治工作已成為我們面臨的一項(xiàng)緊迫任務(wù)，在應(yīng)急處理過(guò)程中，急性感染尤其是急性化膿性感染、嚴(yán)重的組織損傷等這些災(zāi)害現(xiàn)場(chǎng)常出現(xiàn)病理中性粒細(xì)胞增多，因此快速準(zhǔn)確地檢測(cè)中性粒細(xì)胞數(shù)目對(duì)于上述疾病診斷和病情估計(jì)具有決定意義。POCT是一種近年來(lái)強(qiáng)勢(shì)發(fā)展的在患者身邊分析患者樣品的檢測(cè)技術(shù)，其主要特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、使用方便

2、。因此，本課題從有效反映受傷人員感染的血液中性粒細(xì)胞入手，最終目標(biāo)為研制出一種便攜、操作簡(jiǎn)單、無(wú)需電力供應(yīng)、無(wú)需專(zhuān)用場(chǎng)地、快速準(zhǔn)確、樣本微量化的檢測(cè)血液中性粒細(xì)胞的POCT產(chǎn)品。
　　 方法：
　　 1.Percoll分離中性粒細(xì)胞采用加用葡聚糖和不加用葡聚糖的兩種Percoll密度梯度離心法，比較兩種方法的優(yōu)缺點(diǎn)，選擇其中較好的方法為后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用高純度的中性粒細(xì)胞做準(zhǔn)備。
　　 2.中性粒細(xì)胞中酯酶活性的測(cè)定參

3、考骨髓粒細(xì)胞特異性酯酶染色方法及尿干化學(xué)試紙條檢測(cè)粒細(xì)胞酯酶的方法，從而選擇一種能夠反映血液中性粒細(xì)胞數(shù)量的方法。
　　 結(jié)果：不加葡聚糖的Percoll密度梯度離心法簡(jiǎn)便省時(shí)、分離效果好、提取細(xì)胞純度高、細(xì)胞活性達(dá)99％以上。采用尿干化學(xué)試紙條可檢測(cè)血液樣本中的中性粒細(xì)胞，而骨髓粒細(xì)胞特異性酯酶染色方法不能用于測(cè)定血液中性粒細(xì)胞的數(shù)量。進(jìn)一步研究尿干化學(xué)試紙條用于稀釋血液樣本中性粒細(xì)胞的檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)試紙條上白細(xì)胞模塊顏色的深

4、淺隨著中性粒細(xì)胞稀釋液濃度（0-500/μl）的變化而變化。
　　 結(jié)論：
　　 1、不加葡聚糖的Percoll密度梯度離心法簡(jiǎn)便省時(shí)、提取細(xì)胞純度高、細(xì)胞存活率高，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究中性粒細(xì)胞做好了準(zhǔn)備。
　　 2、采用尿干化學(xué)試紙條可檢測(cè)血液樣本中的中性粒細(xì)胞，但是僅限于中性粒細(xì)胞濃度為0-500/μl的稀釋血液樣本。而血液樣本中性粒細(xì)胞的濃度遠(yuǎn)大于此值，故在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中將以此方法為基礎(chǔ)，探討通過(guò)調(diào)整試紙條上與粒細(xì)