柴胡皂苷與黃芩苷配伍抗人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721和HepG2體外作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：探討柴胡皂苷與黃芩苷配伍抗肝癌的協(xié)同作用及其機(jī)制。
　　方法：本研究主要通過體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn),將柴胡和黃芩的主要活性成分柴胡皂苷與黃芩苷配伍給藥作用于人肝癌 SMMC-7721 和 HepG2 細(xì)胞,用 MTT 法測定二者單用及配伍對肝癌細(xì)胞增殖的影響；采用流式細(xì)胞儀 Propidium Iodide(PI)單標(biāo)法檢測對 SMMC-7721 和 HepG2細(xì)胞周期進(jìn)程的影響；用流式細(xì)胞儀 Annexin V-FITC/

2、PI 雙標(biāo)法檢測 SMMC-7721和 HepG2細(xì)胞凋亡率；采用免疫組化法檢測細(xì)胞 SMMC-7721 凋亡相關(guān)基因 bcl-2、caspase-3 和 cox-2 蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)( MTT)中發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷(100 ug/ml,200 ug/ml, 400ug/ml, 800ug/ml, 1600ug/ml)和黃芩苷(10ug/ml, 20ug/ml, 30ug/ml, 40ug/ml, 50ug/

3、ml)配伍對SMMC-7721和HepG2細(xì)胞的增殖作用明顯強(qiáng)于二者單獨(dú)給藥；流式細(xì)胞儀顯示經(jīng)藥物處理48h后,與對照組及兩藥單用組相比, SMMC-7721和HepG2配伍組的細(xì)胞凋亡率明顯增高；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,柴胡皂苷作用于肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞48h后均能使G0/G1期細(xì)胞數(shù)量顯著增加,黃芩苷作用于肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞48h后均能使G0/G1、G2/M期細(xì)胞數(shù)量顯

4、著減少, S期細(xì)胞所占比例顯著增加,配伍組作用 48h后, SMMC-7721和HepG2細(xì)胞的G0/G1期和S期細(xì)胞數(shù)量均增加,與兩藥單用組比較均有顯著性差異,說明兩藥配伍有協(xié)同抑制作用；免疫細(xì)胞化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2表達(dá)降低, cox-2、caspase-3表達(dá)升高,且配伍組作用明顯強(qiáng)于柴胡皂苷組和黃芩苷組。
　　結(jié)論：柴胡和黃芩主要活性成分柴胡皂苷與黃芩苷對抑制肝癌SMMC-7721