酶觸型5-氟尿嘧啶結(jié)腸靶向包衣微丸的研制.pdf

1、目的： 氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)為一優(yōu)良的抗代謝類抗腫瘤藥，臨床可用于消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)的癌癥及肺癌、皮膚癌、頭頸部癌癥等，是結(jié)腸癌首選的化療藥物，但口服后腸道吸收不完全且不規(guī)則，不良反應(yīng)顯著、毒副作用大。將5-FU制成結(jié)腸菌群觸發(fā)型口服結(jié)腸靶向釋藥系統(tǒng)(oral colon-specifc drug delivery System，OCDDS)用于結(jié)腸癌的化療，可將藥物定位于結(jié)腸局部釋藥，在提高局部治

2、療濃度的同時，降低全身吸收和毒副作用。口服結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)近年來受到廣泛重視，它可用于結(jié)腸局部病變?nèi)缃Y(jié)腸癌、結(jié)腸炎等的治療，在蛋白、多肽類藥物的口服給藥上也有廣闊的應(yīng)用前景。 方法： 以微晶纖維素(MCC)為輔料，采用擠出滾圓法制備載藥丸芯，以乙基纖維素水分散體和果膠為包衣材料，流化床包衣法制備5-FU包衣微丸。通過正交實驗設(shè)計篩選優(yōu)化工藝，選擇擠出轉(zhuǎn)速、滾圓轉(zhuǎn)速、滾圓時間作為3種影響因素，分別選取3個不同水平，按L<,

3、9>(3<'4>)正交實驗確定工藝，綜合評價微丸成球性(圓整度和收率)，通過極差分析，確定丸芯制備優(yōu)化工藝。在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上進行流化床包衣工藝單因素考察(包衣溫度、噴霧壓力、輸液速度、鼓風(fēng)機頻率)，確定包衣優(yōu)化工藝；同時以釋放度為指標(biāo)，對果膠和乙基纖維素水分散體的比例和包衣層增重量進行單因素考察，確定了5-FU包衣微丸的優(yōu)化工藝，制備果膠和乙基纖維素水分散體不同的比例和增重量的結(jié)腸靶向包衣微丸，以釋放度為評價指標(biāo)，確定合適的果膠和乙基纖

4、維素水分散體比例和包衣增重。在文獻報道和預(yù)實驗基礎(chǔ)上，建立高效液相分析方法(HPLC)，測定5-FU的含量。色譜條件如下：色譜柱：Diamonsil<'TM> C<,18>，4.6×250 mm；流動相：甲醇：水(30:70)，流速：0.8mL/min；檢測波長：266 nm。 釋放方法選用USP 23，方法1，轉(zhuǎn)速為100 r/min。釋放介質(zhì)分別為：模擬的人工胃液150 mL(0.1 mol/L的鹽酸，oH1.2)2 h后，

5、加入0.2 mol/L Na<,3>PO<,4> 50 mL，pH調(diào)至6.8，3 h后，加入制備好的大鼠盲腸內(nèi)容物溶液，使之含內(nèi)容物為4％，并不斷通入CO<,2>，在規(guī)定的時間點內(nèi)取樣，在波長266 nm處HPLC法測定其濃度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算藥物濃度，求得累積釋放百分率。 考察高溫、高濕和強光照射等因素對5-FU包衣微丸穩(wěn)定性的影響。在溫度40℃，相對濕度75％條件下放置6個月末取樣，觀察其性狀和測定其含量及釋放度，并確定其有

6、效期。 以大鼠為實驗動物，在輕度乙醚麻醉下通過聚乙烯管給大鼠口服5-FU包衣微丸(實驗組)，對照組口服5-FU未包衣微丸。HPLC法考察血液、胃、小腸、盲腸、結(jié)腸和結(jié)腸內(nèi)容物中5-FU的分布情況。 結(jié)果： 對正交實驗結(jié)果進行極差分析，確定制備5-FU微丸丸芯的最優(yōu)工藝為：擠出轉(zhuǎn)速30 r/min，滾圓轉(zhuǎn)速30 r/min，滾圓時間5 min。確定優(yōu)化包衣工藝為：進風(fēng)溫度38℃，噴霧壓力0.5kg，輸液速度1 mL

7、/min。通過處方單因素考察，確定包衣層增重20％，果膠和乙基纖維素水分散體的比例為：1:2。 5-FU包衣微丸HPLC含量測定方法的系統(tǒng)適用性實驗結(jié)果：5-FU保留時間為4.21 min，方法回收率為99.75～100.3％，日內(nèi)精密度RSD(％)為1.25～2.14％，日間精密度RSD(％)為2.54～3.00％，符合中國藥典規(guī)定。此方法能夠準(zhǔn)確測定包衣微丸中5-FU的含量。 在高溫、強光照射條件下，微丸的性狀、含量及釋放度

8、均無顯著性變化，表明5-FU包衣微丸對熱和光均穩(wěn)定。穩(wěn)定性長期試驗于40℃/RH75％放置六個月后，取樣做釋放度實驗，結(jié)果無顯著變化。 5-FU包衣微丸(實驗組)大鼠口服給藥后盲腸內(nèi)容物、盲腸黏膜、結(jié)腸內(nèi)容物和結(jié)腸黏膜中5-FU的濃度明顯高于對照組，平均峰濃度分別為5.33±2.5μg/g，0.54±0.20μg/g，4.66±2.10μg/g和0.31±0.14μg/g，血藥濃度相對較低而平穩(wěn)，達峰時間為14 h，峰濃度3.6

9、5±2.3 μg/g；未包衣微丸(對照組)平均峰濃度分為1.16±0.9μg/g，0.34±0.09μg/g，0.18±0.03μg/g和0.10±0.05μg/g。血藥濃度相對較高，達峰時間為0.75 h，峰濃度為23.54±2.9μg/g。包衣微丸中5-FU主要分布于盲腸和結(jié)腸及其內(nèi)容物中，而在上消化道中檢測不到藥物釋放。未包衣微丸中的5-FU主要分布于上消化道，盲腸和結(jié)腸及其內(nèi)容物中的藥物濃度卻很低。實驗組和對照組的AUC值分別是

10、9.06±1.2μg/h/mL和49.08±3.1μg/h/mL，統(tǒng)計分析表明兩者之間有顯著性差異(p<0.05)。和對照組相比，實驗組的相對生物利用度為18.1％。 結(jié)論： 以果膠/乙基纖維素為薄膜包衣材料制備的5-FU包衣微丸具有良好的體外釋藥特征，重現(xiàn)性好；包衣微丸和未包衣微丸中的5-FU在體內(nèi)的分布是不同的，未包衣微丸中的5-FU主要分布于上消化道；而包衣微丸中的5-FU，主要分布于盲腸和結(jié)腸。藥物在消化道的吸收