雌激素對盆底功能障礙性疾病患者陰道壁成纖維細(xì)胞在應(yīng)力前后增殖和彈性蛋白基因表達(dá)變化的影響.pdf

1、目的
　　 1.了解陰道壁成纖維細(xì)胞應(yīng)力后彈性蛋白(Elastin)mRNA表達(dá)水平的變化;
　　 2.了解陰道壁成纖維細(xì)胞應(yīng)力前后加入雌激素增值率的變化;
　　 3.了解陰道壁成纖維細(xì)胞在應(yīng)力后加入雌激素的作用下彈性蛋白mRNA表達(dá)水平的變化;
　　 4探討力在盆底功能障礙性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)發(fā)病中的作用。
　　 方法:
　　 選取2009年

2、1O月至2010年9月河北醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的因PFD需手術(shù)治療的患者12例,所有患者術(shù)前均參照美國盆腔器官脫垂定量分期法(pelvic organ prolaps quantitation,POP-Q)評分至少一個部位脫垂為Ⅲ、Ⅳ期。其中子宮脫垂合并陰道前壁脫垂5例,子宮脫垂合并陰道后壁脫垂3例,子宮脫垂合并陰道前后壁脫垂4例,另外患者中單純POP9例,POP合并SUI3例。患者平均年齡為58.3±9.6歲,產(chǎn)次為2.9±

3、1.2,體重指數(shù)為23.78±1.90。所有患者均排除呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和皮膚病等結(jié)締組織疾病,所有患者術(shù)前3個月均未服用過雌激素類藥物。于手術(shù)中取陰道壁組織,對其進(jìn)行原代培養(yǎng),選取第3-5代細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對象,用Flexcercell4000柔性基底拉伸加載系統(tǒng)對細(xì)胞施加應(yīng)力,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測定應(yīng)力前后Elastin mRNA的表達(dá)量,并取應(yīng)力后細(xì)胞加入不同濃度17β-雌二醇,再測定Elastin mRNA表

4、達(dá)量,并與應(yīng)力前做比較;對應(yīng)力前后細(xì)胞分別加入不同濃度17β-雌二醇,用MTT方法測定細(xì)胞增殖性,并進(jìn)行比較;
　　 結(jié)果:
　　 1.在體外培養(yǎng)條件下,應(yīng)力后成纖維細(xì)胞Elastin mRNA表達(dá)量為0.4960±0.1928;應(yīng)力前表達(dá)量為O.1862±0.0848,應(yīng)力后表達(dá)量增加。兩組比較統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),說明應(yīng)力對Elastin mRNA的表達(dá)有促進(jìn)作用:
　　 2.在體外培養(yǎng)下,應(yīng)力前細(xì)胞加

5、入終濃度為1×10-4mol/L、l×10-66mol/L、1×10-8mol/L、1×10-10mol/L的17β-雌二醇后增殖率分別為0.54、0.38、0.38、0.23;對應(yīng)力后細(xì)胞也分別加入與應(yīng)力前相同濃度的雌二醇,增值率分別為O.17、O.10、0.07、0.06,均比前組下降。比較兩組數(shù)據(jù),說明雌二醇對陰道壁成纖維細(xì)胞有促進(jìn)增殖作用,不同濃度的雌二醇對陰道壁成纖維細(xì)胞的增殖作用不同,P=0.02<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義,且

6、隨著藥物濃度的加大增殖率也增大,其中1×10-4mol/L組對細(xì)胞的增殖率最大;施加應(yīng)力與不施加應(yīng)力對陰道壁成纖維細(xì)胞的增殖作用顯著不同,P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義;
　　 3.在體外培養(yǎng)條件下,應(yīng)力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表達(dá)量為0.6437±O.1100,比應(yīng)力后不加雌二醇組高,兩組比較統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),說明雌二醇對成纖維細(xì)胞應(yīng)力后Elastin mRNA的表達(dá)有促進(jìn)作用。
　　 結(jié)論:

7、r>　　 1.陰道壁成纖維細(xì)胞應(yīng)力后細(xì)胞生長方向與受力方向一致,并變得較狹長;
　　 2.加力后陰道壁成纖維細(xì)胞Elastin mRNA的表達(dá)量比應(yīng)力前增多,說明應(yīng)力對E1astin mRNA的表達(dá)有促進(jìn)作用,陰道壁成纖維細(xì)胞對應(yīng)力做出反應(yīng),通過增加彈性蛋白的合成和分泌來對抗力的作用,阻止脫垂的發(fā)生;
　　 3.應(yīng)力后加入雌二醇,Elastin mRNA的表達(dá)量比應(yīng)力后不加雌二醇高,說明雌激素對陰道壁成纖維細(xì)胞對抗力的