七氟烷缺血后處理的心肌保護作用的實驗和臨床研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：不同濃度的七氟烷缺血后處理(IPO)對離體大鼠心肌保護作用的研究
　　 目的：采用Langendorff大鼠離體心臟灌注模型，觀察不同濃度七氟烷缺血后處理(IPO)對大鼠心肌的保護作用。
　　 方法：50只雄性SD大鼠，體重270g-300g，隨機分為5組，每組10只。5組分別為:Control組(空白對照，不加任何干擾因素)、ISCH組(心肌缺血未行保護措施)、IPO-1組(

2、心肌缺血+1％七氟烷缺血后處理)、IP0-2組(心肌缺血+2％七氟烷缺血后處理)、IPO.3組(心肌缺血+4％七氟烷缺血后處理)。腹腔內注射2.5％戊巴比妥鈉(50mg/kg)和肝素(10U/g)施行麻醉和抗凝后，開胸，取下心臟放入4℃改良Krebs-Henseleit(K-H)液中，主動脈插管懸掛心臟于Langendorff灌流裝置上，用K-H緩沖液行主動脈灌流(灌注壓為90mmHg)。連接壓力換能器至Biopac5100生物信息采集

3、系統(tǒng)，以AcqKnowledge4.0軟件實時觀察并分析左室發(fā)展壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左心室壓力上升變化最大速率(±dP/dtmax)、心率(HR)。分別記錄平衡20min、復灌15min和60min的冠脈流量(CF)，并收集保存心肌灌注流出液。Control組以K-H緩沖液持續(xù)灌注自主跳動的心臟，不行缺血處理。其余各組均以K-H緩沖液灌注20min，以達平衡(baseline)。ISCH組停止灌注30min以造成

4、全心缺血(globalischemia30min)，然后復灌60min。IPO-1組、IP0-2組和IPO-3組全心缺血30min后，分別在復灌起始給予七氟烷0.5MAC(1.0vol％)、1.0MAC(2.0vol％)和2.0MAC(4.0vol％)15min施行缺血后處理，缺血后處理后繼續(xù)復灌45min。所有各組在復灌(復灌60min)結束后，心臟以2，3，5-氯三苯四唑(TTC)染色法染色，以ImageJ1.37行圖像分析，梗死面

5、積由心室總壞死區(qū)占心室總切片區(qū)的百分數來界定。同時取左心室組織進行石蠟包埋、切片，標本行HE、PTH和TUNEL染色，觀察心肌組織結構和計算凋亡指數(AI)。分別測定心臟灌流平衡20min，復灌15min和60min時的心臟流出液中肌鈣蛋白I(cTnl)的濃度。
　　 結果：1、各組血流動力學基礎值之間無明顯差異(P>0.05)。Contral組LVDP、LVEDP、+dp/dt、和HR在復灌60min時有降低趨勢，但均無統(tǒng)計學

6、意義(P>0.05)。2、LVDP的變化:ISCH組和IPO各組在復灌60min時較基礎值均有下降趨勢，但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3、LVEDP的變化:ISCH組在復灌15min和60min時較基礎值明顯升高(P<0.05)，而IPO各組雖較基礎值有所升高，但均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3、+dp/dt的變化:ISCH組在復灌60min時較基礎值明顯降低(P<0.05)，而IPO各組雖較基礎值有所降低，但均無統(tǒng)計學意義(P>0

7、.05)。4、-dp/dt的變化:ISCH組和IPO-1組在復灌60nun時較基礎值明顯降低(P<0.05)，而IPO其它各組雖較基礎值有所降低，但均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5、HR的變化:ISCH組和IPO-1組在復灌60min時較基礎值明顯降低(P<0.05)，而IPO其它各組雖較基礎值有所降低，但均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。6、CF的變化:Contral組隨著灌注時間的延長、ISCH組和IPO各組隨著復灌時間的延長CF值

8、進行性減少。ISCH組和IPO-1組在復灌15min時CF的減少即有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，復灌60min時所有各組CF的減少均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，P<0.01)。尤以ISCH組的減少最為明顯，較基礎值下降了42％。7、cTnI的變化:Contral組隨著灌注時間的延長、ISCH組和IPO各組隨著復灌時間的延長，心臟灌注流出液cTnl呈升高趨勢。ISCH組、IPO-1組和IP0-2組cTnl的峰值在復灌15min，其中ISC

9、H組和IPO-1組的升高統(tǒng)計學有非常顯著差異(P<0.01)，至復灌60min，該兩組cTnl的升高仍有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。組間比較，復灌15minISCH組和IPO-1組cTnl的升高較Contral組有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；各IPO組復灌15min心臟灌注流出液的cTnl值雖低于ISCH組，但無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。8、梗死區(qū)的變化:Control組未見明顯的梗死區(qū)，而ISCH組和IPO-1組的TTC染色均顯示出

10、明顯的的梗死區(qū)(P<0.05)。各IPO組較ISCH組梗死區(qū)面積的百分比顯著降低(P<0.05)，其中以IPO-2組降低最為明顯(P<0.01)。IPO各組中，梗死區(qū)面積的百分比的順序為:IPO-1組>IP0-3組>IP0-2組。9、AI的變化:AI呈現較為規(guī)則的變化，即ISCH組和IPO各組均明顯高于Control組(P<0.05)，而各IPO組又明顯低于ISCH組(P<0.01)。IPO各組中，尤以IP0-2組AI值降低最為顯著(P

11、<0.01)。IPO各組中，AI的順序為:IPO-1組>IP0-3組>IPO-2組。
　　 結論：不同濃度的七氟烷缺血后處理對離體大鼠心肌均具有保護作用；其保護作用的程度存在差異。與0.5MAC和2MAC濃度的七氟烷相比，1MAC(2vol％)濃度的七氟烷缺血后處理心肌保護作用最佳。
　　 第二部分：七氟烷缺血后處理對體外循環(huán)下行冠狀動脈旁路移植術病人的心肌保護作用的研究
　　 目的：觀察1.OMAC七氟烷缺血后

12、處理(IPO)對體外循環(huán)(CPB)下行冠狀動脈旁路移植術(CABG)病人的心肌保護作用。
　　 方法：選擇體外循環(huán)下行CABG的病人40例，以隨機、對照、盲法分為對照組和后處理組，每組20例。采用全憑靜脈麻醉。對照組常規(guī)麻醉，未給予任何保護措施。后處理組于主動脈開放即刻從體外循環(huán)機中吸入1.OMAC (2vol％)的七氟烷，持續(xù)15分鐘。觀察圍術期血流動力學，心肌組織形態(tài)學，心肌酶學及肌鈣蛋白含量的變化。
　　 結果:所

13、有入選病例均順利完成試驗，未見明顯不良反應，均康復出院。兩組病人圍術期一般資料和血流動力學參數差異不顯著(P>0. 05 )。復灌6h和術后24h血漿CK, CK-MB, LDH和TnI顯著升高，以復灌6h升高最明顯(P<0. 05)0心肌組織形態(tài)學組間比較:后處理組與對照組基礎心肌組織病變無明顯差異，但是后處理組在行七氟烷處理后較對照組心肌病變輕微;組內比較:后處理組體外循環(huán)前后心肌組織病理改變不明顯，而對照組體外循環(huán)后心肌組織病變明