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1、第一部分黃芩苷對(duì)癲癇持續(xù)狀態(tài)后小鼠海馬組織的保護(hù)作用
目的:探討黃芩苷(Baicalin,BCL)對(duì)通過(guò)側(cè)腦室注入海人酸(kainic acid,KA)誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)小鼠的海馬組織的保護(hù)作用。
方法:將22-28g ICR雄性小鼠18只按照隨機(jī)分配原則分為對(duì)照組、癲癇持續(xù)狀態(tài)組和黃芩苷治療組(100mg/kg),共3個(gè)組,各組6只。采用在立體定位儀上向側(cè)腦室內(nèi)以0.1μ
2、g/5μl的濃度注入海人酸0.1μg建立小鼠SE模型。模型制作成功后,對(duì)黃芩苷治療組的癲癇小鼠以100mg/kg的劑量腹腔注射黃芩苷1次,12h后以相同劑量重復(fù)注射黃芩苷1次,對(duì)照組和SE組在相同時(shí)間點(diǎn)給與腹腔注射等量的生理鹽水。于制模24h后,取小鼠腦組織行常規(guī)石蠟包埋切片,通過(guò)HE染色觀察小鼠海馬組織的病理形態(tài)學(xué)變化。
結(jié)果:HE染色可見(jiàn)對(duì)照組海馬CA3區(qū)細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均正常;SE組細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均發(fā)生紊亂,細(xì)胞核明顯固縮
3、、核仁變小甚至消失,胞漿體積增大,有些呈透明化;黃芩苷治療組可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)介于對(duì)照組和SE組之間。
結(jié)論:黃芩苷能夠減輕小鼠癲癇后海馬神經(jīng)細(xì)胞的損傷,起到神經(jīng)保護(hù)作用。
第二部分黃芩苷對(duì)海人酸致癇小鼠海馬組織HO-1和NQO1表達(dá)的影響
目的:研究黃芩苷對(duì)通過(guò)側(cè)腦室注入海人酸誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)小鼠的海馬組織中HO-1、NQO1蛋白表達(dá)的影響,以探討黃芩苷保護(hù)小鼠SE后海馬神經(jīng)的可能機(jī)制。
方法:
4、將22-28g ICR雄性小鼠45只隨機(jī)分為對(duì)照組、癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)組和黃芩苷治療組(100mg/kg)共3個(gè)組,每組15只。采用在立體定位儀上向側(cè)腦室內(nèi)注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)的方法建立小鼠SE模型。模型制作成功后,對(duì)黃芩苷治療組的癲癇小鼠以100mg/kg的劑量腹腔注射黃芩苷1次,12h后以相同劑量重復(fù)注射黃芩苷1次,對(duì)照組和SE組在相同時(shí)間點(diǎn)給與腹腔注射等量的生理鹽水。于制模24h后,各組取5只小鼠腦組織行石
5、蠟包埋切片,通過(guò)免疫組化檢測(cè)血紅素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化還原酶1(NQO1)陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)情況;各組另外10只小鼠取海馬組織,通過(guò)Western blot檢測(cè)HO-1和NQO1蛋白的表達(dá)量。
結(jié)果:①制模24小時(shí)后,免疫組化結(jié)果顯示對(duì)照組海馬CA3區(qū)僅有少量散亂分布的淺黃色HO-1和NQO1陽(yáng)性細(xì)胞,而SE組則可見(jiàn)大量排列紊亂、結(jié)構(gòu)異常的棕黃色HO-1和NQO1陽(yáng)性細(xì)胞(P<0.05)。與SE組相比,黃芩
6、苷治療組中HO-1和NQO1陽(yáng)性細(xì)胞呈棕褐色,數(shù)量更多,排列更緊密,二者差異明顯(P<0.05)。②Western blot結(jié)果顯示,對(duì)照組海馬組織HO-1和NQO1蛋白僅有少量表達(dá),癲癇發(fā)作后的SE組中海馬組織HO-1和NQO1蛋白量顯著增加(P<0.05)。與SE組相比,黃芩苷治療組海馬組織中HO-1和NQO1蛋白的表達(dá)量則進(jìn)一步上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織中 HO-1和NQO1蛋白表達(dá)上調(diào),可
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