黃芩苷對小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織Nrf2、IL-10表達(dá)的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分黃芩苷對癲癇持續(xù)狀態(tài)后小鼠海馬組織Nrf2蛋白表達(dá)的影響
  目的:研究黃芩苷(Baicalin,BCL)對通過側(cè)腦室注入海人酸(kainic acid,KA)建立癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)模型的小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞中Nrf2蛋白表達(dá)的影響。
  方法:將45只體重在22-28g的ICR雄性小鼠隨機分為對照(Sham)組、癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)組、黃芩苷治療(BCL)組3個組,每組15只。采

2、用在立體定位儀上向側(cè)腦室內(nèi)注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)的方法建立小鼠SE模型。模型制作成功后,對BCL組的癲癇小鼠以100mg/kg的劑量腹腔注射黃芩苷1次,12h后以相同劑量重復(fù)注射黃芩苷1次,SE組和Sham組與BCL組同一時間點腹腔注射等量的生理鹽水。于制模24h后,各組取5只小鼠腦組織行石蠟包埋切片,行HE染色觀察海馬組織的形態(tài)學(xué)改變,免疫組織化學(xué)法檢測核因子相關(guān)因子2(Nrf2)陽性細(xì)胞的表達(dá)情況;各組另外10只

3、小鼠取海馬組織,通過Western blot檢測Nrf2蛋白的表達(dá)。
  結(jié)果:
  ①HE染色可見Sham組海馬CA3區(qū)細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均正常;SE組細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均發(fā)生紊亂,細(xì)胞核固縮、核仁變小甚至消失,胞漿體積變大,有些呈透明化;BCL組可見細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)介于Sham組和SE組之間。
 ?、诿庖呓M織化學(xué)結(jié)果顯示Sham組海馬CA3區(qū)僅有少量散亂分布的淺黃色Nrf2陽性細(xì)胞,而SE組則可見大量排列紊亂、架構(gòu)異常的棕黃

4、色Nrf2陽性細(xì)胞(P<0.05)。與SE組比較,BCL組中Nrf2陽性細(xì)胞呈棕褐色,排列更密集,二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
 ?、踂estern blot結(jié)果顯示,Sham組海馬組織Nrf2蛋白僅有少量表達(dá),癲癇發(fā)作后的SE組中海馬組織Nrf2蛋白量顯著增加(P<0.05)。與SE組比較,BCL組海馬組織中Nrf2蛋白的表達(dá)量有較明顯的上調(diào)(P<0.05)。
  結(jié)論:黃芩苷治療能夠減輕小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海

5、馬組織細(xì)胞的損傷。小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織中Nrf2蛋白表達(dá)上調(diào),可能是海馬組織抵抗氧化損傷的一種自我保護(hù)機制,而黃芩苷可能通過增加海馬組織中Nrf2蛋白的表達(dá),從而增強這種海馬的神經(jīng)保護(hù)作用。
  第二部分黃芩苷對小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織IL-10表達(dá)的影響
  目的:探討海人酸(kainic acid,KA)誘導(dǎo)小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)后,黃芩苷(Baicalin,BCL)對其海

6、馬神經(jīng)細(xì)胞的IL-10表達(dá)的影響。
  方法:將22-28g ICR雄性小鼠45只隨機分為 Sham組、SE組、BCL組(100mg/kg)共3個組,每組15只。采取向側(cè)腦室注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)的方法建立小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型(同第一部分)。制模成功后立即向BCL組小鼠腹腔注射黃芩苷(100mg/kg),12h后再以相同的劑量腹腔注射黃芩苷一次。Sham組及SE組予腹腔注射等量生理鹽水。48h后,各組取5只小鼠

7、腦組織行石蠟包埋切片,行HE染色觀察海馬組織的形態(tài)學(xué)改變,免疫組織化學(xué)法檢測白細(xì)胞介素-10(IL-10)陽性細(xì)胞的表達(dá)情況。各組剩余10只小鼠取海馬組織,通過Western blot檢測IL-10蛋白的表達(dá)量。
  結(jié)果:
 ?、倌P椭谱鞒晒?8h后,HE染色圖片上可見Sham組海馬CA3區(qū)細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞形態(tài)未見異常;SE組錐體細(xì)胞排列散亂,大部分細(xì)胞破碎,只剩個別完整細(xì)胞,且形態(tài)異常,有的神經(jīng)細(xì)胞腫脹、胞漿分布不均、

8、核固縮、核仁消失等;BCL組海馬CA3區(qū)只見散在少量的凋亡壞死細(xì)胞。
 ?、谀P椭谱鞒晒?8h后,免疫組織化學(xué)顯示Sham組海馬區(qū)僅有少量的散在淡黃色I(xiàn)L-10陽性細(xì)胞,而SE組則可見分布較多、染色為棕黃色的陽性細(xì)胞。與SE組相比,BCL組海馬組織中陽性細(xì)胞排列較密集,且細(xì)胞染色較深,為棕褐色,二者的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
 ?、踂estern blot檢測顯示,Sham組海馬組織中的IL-10蛋白只少量表達(dá),

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