WB-DWIBS成像檢測(cè)胃癌及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)與組織病理學(xué)的關(guān)系研究.pdf

1、在我國，胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，是我國第二大常見腫瘤。惡性腫瘤一旦確定，疾病程度的判斷(分期)就非常重要，腫瘤分期有助于準(zhǔn)確治療方案的確定以及判斷預(yù)后等。在腫瘤術(shù)前的分期中，影像醫(yī)學(xué)起著至關(guān)重要的作用，同時(shí)也在監(jiān)控療效、檢測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮著重要的作用。在胃癌檢測(cè)的影像學(xué)方法中，氣鋇雙重造影的敏感性和特異性不高。CT對(duì)胃癌分期的準(zhǔn)確性可達(dá)65％～69％，常規(guī)MRI技術(shù)在胃癌分期中的應(yīng)用并不受重視，CT和MR兩種技術(shù)的T、N

2、分期并未顯現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中主要的原因在于兩種技術(shù)均受限于不能檢測(cè)正常大小的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。由此可見，轉(zhuǎn)移小淋巴結(jié)的確定已成為制約利用影像學(xué)技術(shù)對(duì)胃癌正確分期的主要因素。近年來，磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像(DWI)已成為腫瘤檢測(cè)中的重要技術(shù)之一。DWI屬于功能性磁共振成像的一種，可以對(duì)病變內(nèi)部水分子彌散狀況進(jìn)行定性和定量分析，借以反映病變的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和細(xì)胞膜的完整性等微觀變化。在此基礎(chǔ)上，2004年出現(xiàn)的背景抑制全身擴(kuò)散加權(quán)成像技術(shù)(WB-DW

3、IBS)則是DWI技術(shù)的又一次突破，打破了DWI在體部應(yīng)用的一些局限性，可以在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)行全身大范圍的擴(kuò)散成像。特別在惡性腫瘤轉(zhuǎn)移灶的檢測(cè)方面顯示出獨(dú)一無二的優(yōu)勢(shì)，彌補(bǔ)了影像學(xué)技術(shù)在淋巴結(jié)及轉(zhuǎn)移灶定性定位方面的缺陷，因此在胃癌的檢測(cè)及分期方面具有潛在的臨床價(jià)值。惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移機(jī)制至今尚不完全清除，它受到多種因素的調(diào)控，包括病程長(zhǎng)短、發(fā)病部位、腫瘤細(xì)胞的惡性程度以及相關(guān)基因及蛋白的表達(dá)等，如：PCNA、MMP-2、ICAM-1及VE

4、GF-C等，以上因素必然會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的細(xì)胞構(gòu)成、細(xì)胞密度產(chǎn)生一定的影響，進(jìn)而影響淋巴結(jié)內(nèi)水分子的彌散情況。而WB-DWIBS是反應(yīng)細(xì)胞水平水分子彌散的無創(chuàng)檢測(cè)工具，因此基于此，利用DWI及WB-DWIBS不僅能對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行分期，還可對(duì)其生物學(xué)行為進(jìn)行評(píng)估，為臨床的診斷和治療提供更加詳盡的信息，促進(jìn)治療水平的提高。
　　 目的：⑴根據(jù)胃癌的手術(shù)、病理結(jié)果、免疫組化結(jié)果，探討PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C在胃癌

5、中的表達(dá)情況，以及以上蛋白的表達(dá)對(duì)其生物學(xué)行為及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響。⑵根據(jù)胃癌及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的DWI及WB-DWIBS的掃描結(jié)果，探討胃癌及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的影像學(xué)表現(xiàn)特點(diǎn)。⑶探討DWI及WB-DWIBS評(píng)估胃癌的生物學(xué)特征的價(jià)值。
　　 方法：①選擇2009年5月～2010年10月之間在我院行胃癌切除的患者18例，其中男性13例，女性5例，年齡在40～85歲之間，平均為59.2±11.8歲。所有病例手術(shù)前均未行任何的抗腫瘤治療，臨床資料

6、完整。②所有患者的WB-DWIBS掃描利用1.5T的磁共振儀(Philips，Achieva Nova1.5T Dual，Netherland)進(jìn)行掃描。在檢查床上放置掃描加長(zhǎng)板，使研究對(duì)象以仰臥、足先進(jìn)位平臥于加長(zhǎng)板上。激光定位線定位于下頜部位。線圈采用磁體內(nèi)置的BODY線圈，掃描采用多個(gè)層塊的自旋回波(spin echo，SE)方式，采用平面回波(echo planar imaging，EPI)技術(shù)，圖像采集為橫軸位。信號(hào)采集為體線

7、圈，自由平靜呼吸狀態(tài)下進(jìn)行掃描。WB-DWIBS掃描參數(shù)為：TR/TE=shortest/shortest，矩陣=256×256，體素=4mm×4mm，層厚=5mm，層間距=1mm，掃描視野(field of view，F(xiàn)OV)：400mm(左右)×330mm(前后)。信號(hào)平均數(shù)(number of signal averaged，NSA)=2，6值選擇OS/mm2和600s/mm2。掃描范圍從頭至雙膝關(guān)節(jié)以下，共7個(gè)層塊420層。掃描

8、時(shí)間共約16分鐘。③在圖像工作站(Philips extended MR workspace，Philips Medical Systems，Netherland，release2.1，2007-09-07)上使用最大信號(hào)強(qiáng)度投影(maximum intensityprojection，MIP)的方法進(jìn)行圖像重組。將每一層塊所得的圖像沿身體長(zhǎng)軸進(jìn)行多角度旋轉(zhuǎn)重組，之后將各個(gè)層塊的重組圖像使用工作站的拼接(Mobiview)功能功能拼接成

9、全身擴(kuò)散加權(quán)像。將原始橫軸位圖像和重組的全身圖像經(jīng)過黑白灰度反轉(zhuǎn)后得到類似SPECT或PET/CT的圖像。將原始圖像使用(Diffusion)功能重建出ADC圖和EADC圖。結(jié)合T1WI、T2WI等圖像，并通過勾畫和復(fù)制感興趣區(qū)(region of interest，ROI)的方式測(cè)量胃癌、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的信號(hào)強(qiáng)度、信噪比、ADC值和EADC值，較大的病變采用3～5個(gè)ROI進(jìn)行測(cè)量并取平均值，測(cè)量中心避開中心壞死區(qū)。④WB-DWIBS掃描所

10、得圖像均在圖像工作站上進(jìn)行評(píng)價(jià)，將橫軸位圖像逐層進(jìn)行閱片評(píng)價(jià)并記錄檢出的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的數(shù)目。將轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)定義為發(fā)生于胃癌之外周圍腹腔內(nèi)的局限性、結(jié)節(jié)狀高信號(hào)病灶。將DWI圖像、ADC圖和EADC圖進(jìn)行關(guān)聯(lián)，通過勾畫并復(fù)制粘貼ROI的方法分別測(cè)量病灶的ADC值、EADC值和SI值。⑤胃癌病灶切下后，在病灶最大徑處縱行將病灶剖開，觀察并記錄病灶的大體病理表現(xiàn)后常規(guī)固定。大體標(biāo)本觀察病變的大體類型、測(cè)量病灶的最大徑和最小徑。術(shù)中切除可疑淋巴結(jié)并

11、記錄淋巴結(jié)的位置。常規(guī)石蠟包埋后行4μm連續(xù)切片，從中隨機(jī)各取出l張進(jìn)行HE染色，其余的行免疫組織化學(xué)染色。HE染色后觀察胃癌的病理類型、惡性程度以及腫瘤細(xì)胞對(duì)胃壁的浸潤程度。根據(jù)腫瘤細(xì)胞分化程度的不同分為高、中、低分化3級(jí)。浸潤程度分級(jí)則將腫瘤細(xì)胞分別侵及肌層/肌層以內(nèi)、突破肌層但達(dá)漿膜/漿膜以內(nèi)、達(dá)漿膜外時(shí)分別稱為l、2、3級(jí)。凡淋巴結(jié)中檢測(cè)到癌細(xì)胞者為陽性淋巴結(jié)，否則為陰性。PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C單克隆抗

12、體、免疫組化檢測(cè)試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。對(duì)照設(shè)置，以PBS代替一抗作陰性對(duì)照，免疫組化染色步驟參照第一部分。結(jié)果判定由兩位有經(jīng)驗(yàn)的病理學(xué)醫(yī)生進(jìn)行共同判斷，PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C陽性染色是在細(xì)胞胞漿或胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒，在200倍視野下隨機(jī)選取10個(gè)視野計(jì)算陽性細(xì)胞率。⑥測(cè)量所得的所有數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。計(jì)量資料之間的比較采用t檢驗(yàn)或方差分析，顯著性水準(zhǔn)采用0

13、.05(雙側(cè))，相關(guān)性研究采用Pearson相關(guān)分析；比率之間的比較采用卡方檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果：⑴病理結(jié)果顯示本組胃癌均為腺癌，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性率為13.45％。⑵PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C陽性細(xì)胞表達(dá)率分別為78.33％、4.72％、16.35％及76.11％。PCNA與MMP-2、ICAM-1與VEGF-C均為正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。⑶潰瘍型、浸潤型、隆起型3型病例VEGF-C的表達(dá)率分別為79.03

14、％、80.12％、60.02％，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=4.312，P=0.048)；VEGF-C的陽性表達(dá)率與胃癌的最大徑線呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.752，P=0.046)。⑷MMP-2與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)陽性率、與陽性淋巴結(jié)數(shù)、與小彎側(cè)的陽性淋巴結(jié)率均呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。⑸胃癌中PCNA與MMP-2、ICAM-1與VEGF-C相互協(xié)調(diào)，參與其淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。⑹WB-DWIBS圖像上胃癌顯示為程度不同的高信號(hào)，少量病灶為略高信號(hào)，易為其他組

15、織器官的高信號(hào)所掩蓋而不易顯示。⑺DWIBS圖像顯示的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)陽性率為62.16％(23/37)。⑻胃癌的ADC值隨浸潤分級(jí)的逐漸增加而下降，EADC值則正好相反(P<0.05)。⑼轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)陽性率與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的ADC值呈正相關(guān)(P<0.05)。⑽MMP-2陽性表達(dá)率與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的EADC呈負(fù)相關(guān)，PCNA與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的ADC呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。
　　 結(jié)論：①WB-DWIBS可用于檢測(cè)胃癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，但部分病灶顯