促紅細胞生成素對長期血液透析患者T淋巴細胞亞群和Th1-Th2類細胞因子影響的研究.pdf

1、促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)是可以選擇性刺激造血干細胞增生分化成紅細胞的集落刺激因子。EPO的產(chǎn)生細胞主要位于腎皮質(zhì)近曲小管周圍的間質(zhì)細胞或基底膜內(nèi)。慢性腎功能衰竭晚期因腎單位大部分遭破壞，EPO生成量明顯減少，同時伴有釋放缺陷，致EPO相對或絕對缺乏而導(dǎo)致’腎性貧血。促紅細胞生成素于19世紀(jì)問世，并于80年代實現(xiàn)了基因重組促紅細胞生成素(rh-EPO)的生產(chǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于臨床。如今rh-EPO已成為治療。

2、腎性貧血的首選藥物。近年研究表明，使用rh-色PO除能較好糾正貧血外，對改善腎功衰竭患者紅細胞免疫以及細胞和體液免疫功能等方面都有明顯作用。 T淋巴細胞是機體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一大細胞群，在正常機體內(nèi)各個T淋巴細胞亞群相互作用，維持著機體正常的免疫功能。輔助性T細胞在免疫應(yīng)答中作用復(fù)雜，根據(jù)其分泌細胞因子的不同，可以將其分為兩組功能性亞群，Th1型細胞因子包括IFN-γ、IL-2和TNF-α等，主要輔助細胞免疫應(yīng)答。Th2型

3、細胞因子包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10，主要輔助體液免疫應(yīng)答。其中TNF-a和IL-6作為常見的炎性細胞因子，在機體感染過程中起著重要作用。 目的 本研究通過觀察慢性腎功能衰竭長期血液透析患者給予不同用法rh-EPO治療前后免疫球蛋白含量、T淋巴細胞亞群及Th1型細胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型細胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平表達的改變，探討rh-EPO對患者體液免疫、細

4、胞免疫功能和Th1/Th2型細胞因子的影響，及對免疫紊亂狀態(tài)的改善情況。并通過對IL-6、TNF-a等炎性因子變化的研究，觀察rh-EPO用藥后是否能糾正其易感染狀況。 材料和方法 1、臨床資料：慢性腎衰竭維持性血透患者60例，隨機分成3組，每組各20例。A組：給予rh-EPO(益比奧-沈陽三生制藥)10000U，每周一次皮下注射；B組：給予相同劑量rh-EPO，每周分2～3次皮下注射；C組：為對照組，不用rh-EPO。

5、 2、實驗方法：三組患者分別于治療前及治療8周后采血，EDTA抗凝。采用免疫透射比濁法測定免疫球蛋白；采用APAAP酶聯(lián)免疫分析法測定T淋巴細胞亞群；采用RT-PCR檢測Th1型細胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型細胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平的表達。同時觀察3組患者治療期間貧血狀況的改善及感染發(fā)生率。 3、統(tǒng)計分析：全部結(jié)果采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析。 結(jié)果

6、 1、生化結(jié)果及貧血狀況：治療后RBC總數(shù)、Hot和Hb在A組和B組較治療前均有明顯升高(P<0.01)，與對照組相比統(tǒng)計學(xué)存在明顯差異，但A、B兩組之間進行比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。而BUN、Scr在治療后都沒有明顯變化，與治療前和對照組相比無顯著性差異(P>0.05)。 2、免疫球蛋白治療前后變化：經(jīng)rH-EPO治療后，A、B兩組患者IgG改善明顯，其中A組由治療前的8.03±1.12 mg/ml升高為11.56±2.01 mg

7、/ml，而B組由治療前的8.14±1.35mg/ml升高為10.96±1.67mg/ml，接近正常，與對照組相比，有顯著性差異(P<0.01)。但A、B兩組之間無顯著性差異。IgA、IgM變化不大，統(tǒng)計學(xué)處理無差異(P>0.05)。 3、T淋巴細胞亞群治療前后變化：rh-EPO治療后，A組CD3+由治療前的38.27±10.10％提高到49.92±10.63％；B組CD3+由治療前的38.06±11.20％提高到45.84±11

8、.20％(A組t=3.562，P<0.01；B組t=3.102，P<0.05)。A組CD4+由治療前的20.50±7.27％提高到30.52±7.63％；B組CD4+由治療前的22.60±11.38％提高到31.51±9.05％(A組t=2.870，P<0.05； B組t=2.902，P<0.05)，與對照組比較，數(shù)量明顯增加，而CD8+沒有明顯變化(P>0.05)，因而導(dǎo)致A、B兩組的CD4+/CD8+比例升高，A組由治療前的1.06

9、±0.54升高為治療后的1.57±0.53，B組由治療前的1.06±0.48升高為治療后的1.70±0.75。但A、B兩組之間無明顯差異。 4、Th1/Th2類細胞因子mRNA表達水平比較：經(jīng)rh-EPO治療后，A組外周血單個核細胞TNF-αmRNA相對表達密度由治療前的0.68±0.21降為0.26±0.11；B組由治療前的0.74±0.27降為0.31±0.12。A組IL-4的mRNA相對表達密度由治療前的0.36±0.18

10、降為0.11±0.04；B組由治療前的0.42±0.15降為0.13±0.07。A組IL-6的mRNA相對表達密度由治療前的0.32±0.12降為0.16±0.09；B組由治療前的0.38±0.14降為0.18±0.10(P<0.01)，與對照組比較，有顯著性差異(P<0.01)。A、B兩組之間未見到明顯差異。由于慢性腎衰竭維持性血透患者均呈免疫功能嚴重低下狀態(tài)，未檢測到IFN-γ、IL-2和IL-10 mRNA的表達。 5、r

11、h-EPO對維持性血透患者感染發(fā)生的影響：3組尿毒癥血透患者在8周治療期間的感染發(fā)生例數(shù)分別為A組15％(3例)、B組20％(4例)、C組35％(7例)， A、B兩組尿毒癥患者在EPO治療期間的感染發(fā)生例數(shù)均低于對照組，統(tǒng)計學(xué)分析顯示A、B兩組與對照組之間存在統(tǒng)計學(xué)差異(A、C組比較x<'2>=31.35，P<0.01；B、C組比較x<'2>=31.35，P<0.01)。 結(jié)論 1、rh-EPO可有效改善尿毒癥患者貧血狀

12、況。 2、rh-EPO治療可明顯提高CRF患者的IgG濃度，改善患者的體液免疫功能。 3、rh-EPO治療后CD3+T細胞亞群、CD4+T細胞亞群及CD4+/CD8+比率顯著升高，有效調(diào)節(jié)尿毒癥患者T淋巴細胞亞群免疫紊亂的狀況。 4、rh-EPO治療后Th2類細胞因子表達降低，使Th1/Th2平衡向Th1方向轉(zhuǎn)化，有效調(diào)節(jié)Th1/Th2類細胞因子失衡狀態(tài)；致炎因子IL-6、TNF-α表達顯著降低，抗炎作用增強。