角毛殼菌抗藥性基因轉(zhuǎn)化子的研究.pdf

1、本實驗以角毛殼菌(Chaetomium cupreum)及其抗藥性基因轉(zhuǎn)化子C1、C2為實驗材料,對角毛殼菌(C. cupreum)抗藥性基因轉(zhuǎn)化子從生理特性、培養(yǎng)特性、生物防治特性、產(chǎn)細(xì)胞壁降解酶特性四方面進(jìn)行研究,為轉(zhuǎn)化子的發(fā)酵生產(chǎn)與田間應(yīng)用提供了科學(xué)的理論依據(jù)。對角毛殼菌(C. cupreum)轉(zhuǎn)化子生物學(xué)特性的研究表明：轉(zhuǎn)化子C1、C2對多菌靈的抗性可達(dá)到40~50μg/mL,這比野生型菌株提高了70~80倍。而轉(zhuǎn)化子在菌落形態(tài)

2、、生長速度、菌絲形態(tài)上與野生型菌株發(fā)生了較大的改變,主要表現(xiàn)在菌落顏色變深、生長速度減慢、菌絲間隔變大、子囊殼顏色變深等方面。通過改變不同的培養(yǎng)條件觀察轉(zhuǎn)化子的生長狀態(tài)可知：PSA培養(yǎng)基和基本培養(yǎng)基對轉(zhuǎn)化子的菌落生長和產(chǎn)子囊孢子最為有利,其次為PDA培養(yǎng)基,而查氏培養(yǎng)基最不利于轉(zhuǎn)化子的生長；轉(zhuǎn)化子的最適生長pH值為pH 5.5~7,溫度為25℃；轉(zhuǎn)化子可以很好的利用半乳糖、蔗糖、果糖為碳源,利用蛋白胨、牛肉浸膏為氮源,而麥芽糖、乳糖、脲

3、素對轉(zhuǎn)化子的生長不利。對轉(zhuǎn)化子室內(nèi)拮抗作用的研究表明：轉(zhuǎn)化子C1、C2對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)、楊樹葉枯病菌(Aftrnaria alternata)、核盤菌( Sclerotinia sclrotiorum)的拮抗作用沒有發(fā)生改變,對尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)的拮抗作用與野生型菌株相比有所下降,而角毛殼菌(C. cupreum)及其轉(zhuǎn)化子對大豆疫霉菌(Phytophthora soj

4、ae)的拮抗效果都不是很理想。對轉(zhuǎn)化子產(chǎn)細(xì)胞壁降解酶的研究發(fā)現(xiàn)：角毛殼菌(C. cupreum)及其轉(zhuǎn)化子在5種病原菌細(xì)胞壁的誘導(dǎo)下都可以產(chǎn)生β-1,3-葡聚糖酶和幾丁質(zhì)酶,其中以楊樹葉枯病菌(A. alternata)和立枯絲核菌(R. solani)細(xì)胞壁為誘導(dǎo)物產(chǎn)酶的效果最好。C1、C2與野生型角毛殼菌(C. cupreum)的產(chǎn)酶特性基本相同,只是在產(chǎn)酶時間上比野生型延遲2~3 d。通過與室內(nèi)拮抗作用結(jié)果相聯(lián)系發(fā)現(xiàn)角毛殼菌(C.