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1、禽腺病毒4型(Fowl adenovirus serotype4,F(xiàn)AdV-4)屬于禽腺病毒(Fowl adenovirus,F(xiàn)AV)C型,禽腺病毒屬腺病毒科。FAdV-4已經(jīng)在世界各地禽類中流行并發(fā)病,該病不僅對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成巨大損失,還對(duì)世界各地動(dòng)物生物安全造成巨大危害。近年來國(guó)內(nèi)外對(duì)FAdV-4的研究主要是在禽類的眼、呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng),對(duì)免疫系統(tǒng)方面的研究鮮有報(bào)道。
本試驗(yàn)用FAdV-4人工感染3周齡白羽肉雞,分別采用HE
2、染色和實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)了不同感染時(shí)間雞感染FAdV-4后胸腺組織病理損傷,免疫相關(guān)基因mRNA的表達(dá)變化。獲得結(jié)果如下:
1、將FAdV-4(103EID50/mL)人工感染非免健康白羽肉雞,于感染后不同時(shí)間采集胸腺組織。感染雞于3dpi前未出現(xiàn)明顯癥狀,在4dpi突然出現(xiàn)死亡,從7dpi開始癥狀逐漸減輕,15dpi基本恢復(fù)健康。通過絕對(duì)定量PCR法檢測(cè)表明FAdV-4的Hexon基因最早在感染后1天(dpi)即可在胸
3、腺中檢出,在4dpi達(dá)到最高,隨后逐漸降低。HE染色觀察表明:在4dpi與5dpi胸腺組織出現(xiàn)明顯的胸腺萎縮,且出現(xiàn)明顯的出血、充血和局部組織壞死等病變之后病變損傷逐漸減輕。以上表明成功建立了FAdV-4感染雞模型。
2、通過熒光定量RT-PCR法對(duì)FAdV-4人工感染雞胸腺組織中免疫相關(guān)基因mRNA的檢測(cè)表明:TLR3/7及MDA5的基因在胸腺組織中呈上調(diào)趨勢(shì),其中MDA5上調(diào)水平差異極顯著(P<0.001);IL-2、IF
4、N-α、IFN-β在胸腺組織中表達(dá)水平均在4dpi達(dá)到峰值;IFN-α、IFN-β表達(dá)水平在感染后先上調(diào)再下調(diào)且都在1dpi開始上調(diào),上調(diào)倍數(shù)分別為1.22、1.40;11dpi開始下調(diào),下調(diào)倍數(shù)分別為0.49、0.72,且兩者表達(dá)趨勢(shì)相差不大。胸腺組織中IL-4、IL-10表達(dá)水平分別在3dpi、5dpi達(dá)到峰值,隨后逐漸下降;TGF-β1、TGF-β2都在4dpi達(dá)到峰值。以上表明胸腺中天然免疫相關(guān)基因表達(dá)變化趨勢(shì)與病毒增殖水平較相
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