氫氣對糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷中氧化應(yīng)激的影響及其作用機制的研究.pdf

1、目的:研究氫氣對糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷中氧化應(yīng)激的影響及其作用機制。
　　方法:本實驗將60只成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠（300-350克）隨機數(shù)字表法分為六組，非糖尿病假手術(shù)對照組(NS)，非糖尿病I/R組(NI/R)，非糖尿病I/R氫氣治療組(NH)，糖尿病假手術(shù)對照組(DS)、糖尿病I/R組(DI/R)、糖尿病I/R氫氣治療組(DH)，每組10只。DS、DI/R、DH組大鼠腹腔注射鏈尿佐菌素后血糖

2、持續(xù)一周≥16.7mmol/L建立糖尿病大鼠模型。NI/R、NH、DI/R、DH組采用結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支30min后松開并再灌注120min的方法建立心肌I/R損傷模型,假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎，氫氣治療組于再灌注同時腹腔注射濃度為99.9％的氫氣5ml/kg。各組于再灌注120min后取心肌組織觀察病理學變化，采用比色法檢測心肌組織內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量變化，免疫組織化學檢測各組8-羥基鳥嘌呤(8-OH-d

3、G)表達水平。利用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription PCR，RT-PCR)技術(shù)檢測各組Nrf2mRNA表達。
　　結(jié)果:1、SOD活性:與NS組相比，NI/R組活性明顯下降(P＜0.01)，與NI/R組相比，NH組活性明顯升高(P＜0.01);與DS組相比，DI/R組活性明顯下降(P＜0.01)，與DI/R組相比，DH組活性明顯升高(P＜0.01)。DS組較NS組、DI/R組較NI/R組、DH組較NH

4、組，其活性均有不同程度的降低(P＜0.01)。2、MDA含量測定:與NS組相比，NI/R組含量明顯升高(P＜0.01)，與NI/R組相比，NH組含量明顯下降(P＜0.01);與DS組相比，DI/R組含量明顯升高(P＜0.01)，與DI/R組相比，DH組活性明顯下降(P＜0.01)。DS組較NS組、DI/R組較NI/R組、DH組較NH組，其含量均有不同程度的升高（P＜0.01或P＜0.05）。3、8-OH-dG陽性細胞百分率:與NS組相比

5、，NI/R組明顯增多(P＜0.01)，與NI/R組相比，NH組明顯減少(P＜0.01);DS組相比，DI/R組明顯增多(P＜0.01)，與DI/R組相比，DH組明顯減少(P＜0.01)。DS組較NS組、DI/R組較NI/R組、DH組較NH組，其陽性細胞百分率均有不同程度的增加(P＜0.01)。4、Nrf2mRNA表達水平:與NS組相比，NI/R組明顯升高(P＜0.01)，與NI/R組相比，NH組明顯升高(P＜0.01);與DS組相比，D

6、I/R組明顯升高(P＜0.01)，與DI/R組相比，DH組明顯升高(P＜0.01)。DS組較NS組、DI/R組較NI/R組、DH組較NH組Nrf2mRNA表達水平增加(P＜0.01)。
　　結(jié)論:1、提示糖尿病可加重大鼠心肌缺血再灌注損傷，氫氣腹腔注射可有效改善糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷。2、氫氣腹腔注射有效改善糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷是通過提高SOD活性，提高抗氧化應(yīng)激水平來實現(xiàn)。3、氫氣抗氧化的機制可能與激活內(nèi)源性Nrf