(一)碳青霉烯類抗生素體外抗菌活性及其耐藥機(jī)制研究;(二)重組大腸埃希菌AcrAB外排泵的構(gòu)建.pdf

1、碳青霉烯類抗生素是治療臨床感染性疾病的強(qiáng)有效藥物,但是近年來對碳青霉烯類抗生素耐藥的菌株越來越多。碳青霉烯酶尤其是可轉(zhuǎn)移性碳青霉烯酶的出現(xiàn)和蔓延給臨床治療感染性疾病帶來了巨大的挑戰(zhàn)。
　　 本論文研究碳青霉烯類抗生素對臨床分離菌株的體外抗菌活性及耐藥性。對2007-2009年從北京地區(qū)醫(yī)院收集的8種352株臨床分離菌及標(biāo)準(zhǔn)菌株采用平皿二倍稀釋法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),測定其對美羅培南、亞胺培南/西司他丁、帕尼培南、法羅培南的MIC值。根據(jù)

2、MIC結(jié)果分析各種臨床分離菌對碳青霉烯類抗生素的敏感性和耐藥率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)4種碳青霉烯/青霉烯類抗生素(美羅培南、亞胺培南/西司他丁、帕尼培南和法羅培南)總體上對北京地區(qū)臨床分離的革蘭陽、陰性菌都具有較強(qiáng)的抗菌活性,細(xì)菌的敏感率分別為82.1％,85.5％,82.1％和83.2％,耐藥率分別為12.8％,12.8％,12.8％和12.5％。在革蘭陰性菌中,大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌和陰溝桿菌對碳青霉烯/青霉烯類抗生素耐藥水平很低,僅有8.

3、7％陰溝桿菌對法羅培南耐藥,而鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌的耐藥率很高,耐藥率達(dá)27％～54％；在革蘭陽性菌中,金黃色葡萄球菌的耐藥性最強(qiáng),表皮葡萄球菌和糞腸球菌次之。
　　 選擇耐藥率較高的鮑曼不動(dòng)桿菌及銅綠假單胞菌進(jìn)行碳青霉烯酶基因 PCR篩選,分析耐藥機(jī)制。從14株耐藥銅綠假單胞菌中檢測出一株攜帶VIM-2基因,從17株耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中均檢出OXA-23基因。將VIM-2和OXA-23基因克隆至表達(dá)載體pET-30,并轉(zhuǎn)化