基因工程制備hITF及其對(duì)腸粘膜保護(hù)作用的研究.pdf

1、上海交通大學(xué)2 0 0 3 N 博士學(xué)位論文Y ，9 8 1 7 0 G基因工程制各h l T F 及其對(duì)腸粘膜保護(hù)作用的研究H 1 G H L l C V E L l c X J ) R E S S I O NO F R E C o M B l N A N T H U M A NI N T E S ⅡN A L T R E F o I L R ～C T o R I N P I C H I A P A S T o R I S A N D

2、I r l l SP R o T E C T I o N A G A I N S T I N T E S T I N A L M U C o S A L研究生姓名研究生學(xué)號(hào)D A M A G E劉偉1 0 3 0 6 2指導(dǎo)教師 許春娣教授導(dǎo)師組成員 陳舜年教授學(xué)科專業(yè) 兒科學(xué)消化專業(yè)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士學(xué)位論文提交日期2 0 0 6 年5 月培養(yǎng)單位 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院本課題得到上海市科委2 0 0 3 年基礎(chǔ)項(xiàng)目重大課題的資

3、助。編號(hào)：0 3 J c l 4 0 4 1l g [ ' ／．- I ：人小腸三葉因子，重組h l T F ，畢赤酵母，發(fā)酵表達(dá)，腸粘膜，損傷修復(fù)間給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物重組h l T F ，觀察不同濃度h I T F 在整體水平對(duì)腸粘膜的預(yù)防性保護(hù)作用以及促進(jìn)腸粘膜損傷后修復(fù)的作用。在5 L 發(fā)酵罐中獲得發(fā)酵液約3 ．5 L ，上清液約2 ．5 L ，總純化得率為3 j 一4 5 ％，共獲得目的蛋白2 5 0 m g ，純度>

4、9 6 ％，蛋白表達(dá)水平為7 3 ．3 3 m g ／L 。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在1 0 一～1 0 。濃度范圍內(nèi)重組h I T F能夠促進(jìn)腸上皮細(xì)胞的遷移，但是對(duì)腸上皮細(xì)胞的光鏡一卜形態(tài)和腸，h皮細(xì)胞的增殖功能影響不顯著。整體水平實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在腸粘膜損傷之前或之后給予不同濃度的外源性h l T F 的實(shí)驗(yàn)組，大鼠腸粘膜損傷程度明顯較對(duì)照組輕，大體損傷評(píng)分和病理組織學(xué)評(píng)分均明顯低于對(duì)照組，而且實(shí)驗(yàn)組的髓過(guò)氧化物酶活性也明顯低于對(duì)照組。表