清胰Ⅱ號(hào)制劑對SAP大鼠腸粘膜屏障功能保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過建立重癥急性胰腺炎大鼠模型,觀察其腸粘膜屏障功能損傷程度,應(yīng)用谷氨酰胺和清胰Ⅱ號(hào)制劑對其干預(yù)及治療,探討清胰Ⅱ號(hào)制劑對SAP大鼠腸粘膜屏障功能的保護(hù)作用,為其進(jìn)一步開發(fā)、臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:104只SD大鼠,體重240±30g,雌、雄各半,隨機(jī)分五組:假手術(shù)組(A組,n=8)、SAP模型組(B組,n=24)、清胰Ⅱ號(hào)制劑治療組(C組,n=24)、谷氨酰胺治療組(D組,n=24)、清胰Ⅱ號(hào)制劑加谷氨

2、酰胺治療組(E組,n=24)。A組開腹后僅翻動(dòng)腸管;B、C、D、E組用3％牛磺膽酸鈉制備SAP大鼠模型。麻醉清醒,A、B組用灌胃器按1ml/100g/次生理鹽水灌胃;C組用濃度為250g/L清胰Ⅱ號(hào)制劑按1ml/100g/次灌胃;D組用濃度為190mg/mL谷氨酰胺稀釋液按1ml/100g/次灌胃;E組用C組加D組的方法處理。A組關(guān)腹后6小時(shí)取材,其余各組在制模后6、12、24小時(shí)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)取材,每時(shí)間點(diǎn)取大鼠8只,觀察腹腔內(nèi)胰腺、胃腸

3、道、周圍組織大體及腹水情況。取胰腺組織做光鏡病理檢查,并行病理評分;回腸組織分別行掃描電鏡、透射電鏡及光鏡病理檢查,并行病理分級評分。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗夾心法檢測血清腫瘤壞死因子-α、二胺氧化酶、D-乳酸濃度,比色反應(yīng)酶活力法檢測血清淀粉酶活性。
　　 結(jié)果:與A組相比,B組6、12、24小時(shí)腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的濃度水平顯著升高(P＜0.001);組內(nèi)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的值逐漸升高,比較有差異(P＜0

4、.05)。與B組相比,C、D、E三組6、12、24小時(shí)腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的濃度水平降低(P＜0.05);三組內(nèi)6、24小時(shí)及12、24小時(shí)間腹水量有差異(P＜0.05);血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的濃度水平隨時(shí)間延長逐漸升高,組內(nèi)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)有差異(P＜0.05)。與E組相比,C、D組6、12、24小時(shí)腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的濃度水平同時(shí)間點(diǎn)升高(P＜0.0

5、5)。胰腺病理評分B、C、D、E組高于A組(P＜0.05);與B組比較,C、D、E三組在同時(shí)間點(diǎn)胰腺病理評分均減低(P＜0.05);與E組相比,C、D兩組在同時(shí)間點(diǎn)上均升高(P＜0.05),C、D組間無差異性(P＞0.05)?；啬c病理分級評分6小時(shí)B、C、D、E組高于A組(P＜0.01);12、24小時(shí)C、D、E組低于B組(P＜0.05),C、D兩組高于E組(P＜0.05)。回腸掃描電鏡:A組回腸粘膜表面微絨毛清晰、直立、凸起,排列較整

6、齊;B組回腸粘膜及微絨毛壞死、脫落、融合,其表面見網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)覆蓋;C組回腸粘膜表面微絨毛隱約可見,萎縮變短,部分脫落,排列欠整齊?；啬c透射電鏡:A組腸粘膜上皮內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體輕度腫脹,微絨毛結(jié)構(gòu)正常;B組微絨毛受損、腫脹,腸粘膜上皮細(xì)胞腫脹明顯,可見早期凋亡細(xì)胞。
　　 結(jié)論:SAP大鼠并發(fā)有腸粘膜屏障功能損傷及障礙:清胰Ⅱ號(hào)制劑與谷氨酰胺均能降低血清中AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的濃度,減少腹水的生成,減輕胰腺及腸粘膜