髓鞘堿性蛋白神經(jīng)毒性的機制研究.pdf

1、背景:中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后會導致髓鞘降解，這不僅抑制神經(jīng)元生長，甚至誘導神經(jīng)元變性死亡。脫髓鞘后，髓鞘相關蛋白（Nogo，MAG，OMgp和MBP）將暴露于組織外，產(chǎn)生病理影響。目前對Nogo，MAG，OMgp等“myelin inhibitor”通過Nogo或PirB受體抑制神經(jīng)再生的研究較為深入具體。生理情況下，MBP與質膜內(nèi)表面緊密結合，維持正常的髓鞘形態(tài)和結構。髓鞘解體后，MBP由胞內(nèi)脂相環(huán)境暴露于胞外水相環(huán)境，部分MBP從髓鞘解

2、脫以游離形式存在于細胞外基質中而起作用。長期以來，脫髓鞘病變后，MBP對神經(jīng)元是否有直接作用仍未清楚。
　　目的:我們發(fā)現(xiàn)MBP在體外具有選擇性神經(jīng)毒性作用。本課題擬進一步確認MBP的神經(jīng)毒性作用，篩選鑒定與其相互作用的膜組分并闡明其作用機制。此研究將有助于我們更好的理解脫髓鞘導致神經(jīng)元損傷的機制，為今后的臨床治療提供有力指導。
　　方法:我們利用DAPI-PI雙染鑒定神經(jīng)元死亡情況;利用免疫細胞化學方法判斷MBP的結合方式

3、;利用蛋白免疫印跡，電生理，鈣成像，鈣黃綠素通透，人工脂質體分析等實驗去探索MBP引起神經(jīng)元死亡的機制。
　　結果:MBP可以特異地結合到體外培養(yǎng)的神經(jīng)元表面并特異地誘導神經(jīng)元死亡。MBP結合到神經(jīng)元表面具有堿性依賴性，因為這種結合可以被酸性磷脂阻斷并受到其他堿性蛋白的競爭性阻斷。進一步的研究表明，MBP通過去極化神經(jīng)元膜、增加對離子和大分子的通透、降低神經(jīng)元膜的流動性來損傷神經(jīng)元膜的功能并破壞其完整性。最后，人工脂質體實驗顯示M