理氣清熱活血方及其拆方調(diào)節(jié)人甲狀腺癌細胞SW579 TSHR-PLC-β-PKC-α信號轉(zhuǎn)導的研究.pdf

1、目的:通過觀察理氣清熱活血方(以下簡稱W)及其三個拆方理氣方(以下簡稱L),清熱方(以下簡稱Q),活血方(以下簡稱H)對人甲狀腺癌細胞SW579增殖抑制和TSHR-PLC-β-PKC-α信號轉(zhuǎn)導通路的影響,研究理氣、清熱、活血三法治療甲狀腺癌的機理,探討氣滯、熱毒與瘀血與甲狀腺癌病變和TSHR-PLC-β-PKC-α信號轉(zhuǎn)導的關系。
　　方法:采用人甲狀腺癌細胞SW579為實驗對象,顯微鏡下觀察細胞的生長情況,計算出細胞抑制率,進

2、而篩選出有效的藥物;用正交設計選出療效最好的方劑;用對照組和理氣清熱活血方及其三個拆方處理細胞,顯微鏡下觀察SW579細胞生長狀態(tài)及形態(tài)改變,用Western blot檢測各治法組對SW579細胞TSHR-PLC-β-PKC-α信號轉(zhuǎn)導通路中各蛋白表達的影響。
　　結(jié)果:1.理氣清熱活血方及其三個拆方對SW579細胞增殖明顯抑制,對細胞形態(tài)作用明顯不同,理氣組細胞可見細胞表面粗糙,細胞內(nèi)充滿大量顆粒狀或空泡樣物質(zhì),皿中有少量細胞碎

3、片?；钛M可見細胞形態(tài)皺縮,透光度減低,形態(tài)不規(guī)則,貼壁性變差,細胞碎片增多。清熱組細胞可見細胞疏松膨脹,細胞變成圓球形,細胞間隙變大,胞質(zhì)粗糙,可見有較多的細胞碎片。全方組細胞表面粗糙,多數(shù)細胞呈空泡樣結(jié)構(gòu),有大量的細胞碎片。2.理氣清熱活血方及其拆方均能抑制SW579細胞生長,全方抑制作用最強,抑制率隨藥物濃度、時間的增加而上升,對細胞生長抑制呈現(xiàn)劑量—效應和時間—效應依賴關系。3.人甲狀腺癌SW579細胞可檢測到TSHR、PLC-

4、β、PKC-α蛋白分子的超量表達。4.用IC50藥物濃度處理細胞時,理氣清熱活血方及其拆方均能調(diào)節(jié)TSHR-PLC-β-PKC-α信號通路各個蛋白表達水平。
　　結(jié)論:1.理氣清熱活血方及其三個拆方對人甲狀腺癌細胞SW579的生長均有抑制,全方組效果最好,理氣、清熱、活血三法具有協(xié)同效應。2.理氣清熱活血方及其拆方均能降低SW579細胞TSHR–PLC–β-PKC-α信號通路各蛋白表達的水平,理氣清熱活血方及其三個拆方抑制甲狀腺癌