理氣清熱活血方及其拆方調(diào)節(jié)人甲狀腺癌細(xì)胞SW579 TSHR-PLC-β-PKC-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀(guān)察理氣清熱活血方(以下簡(jiǎn)稱(chēng)W)及其三個(gè)拆方理氣方(以下簡(jiǎn)稱(chēng)L),清熱方(以下簡(jiǎn)稱(chēng)Q),活血方(以下簡(jiǎn)稱(chēng)H)對(duì)人甲狀腺癌細(xì)胞SW579增殖抑制和TSHR-PLC-β-PKC-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,研究理氣、清熱、活血三法治療甲狀腺癌的機(jī)理,探討氣滯、熱毒與瘀血與甲狀腺癌病變和TSHR-PLC-β-PKC-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系。
　　方法:采用人甲狀腺癌細(xì)胞SW579為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,計(jì)算出細(xì)胞抑制率,進(jìn)

2、而篩選出有效的藥物;用正交設(shè)計(jì)選出療效最好的方劑;用對(duì)照組和理氣清熱活血方及其三個(gè)拆方處理細(xì)胞,顯微鏡下觀(guān)察SW579細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)及形態(tài)改變,用Western blot檢測(cè)各治法組對(duì)SW579細(xì)胞TSHR-PLC-β-PKC-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中各蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:1.理氣清熱活血方及其三個(gè)拆方對(duì)SW579細(xì)胞增殖明顯抑制,對(duì)細(xì)胞形態(tài)作用明顯不同,理氣組細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞表面粗糙,細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)大量顆粒狀或空泡樣物質(zhì),皿中有少量細(xì)胞碎

3、片。活血組可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)皺縮,透光度減低,形態(tài)不規(guī)則,貼壁性變差,細(xì)胞碎片增多。清熱組細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞疏松膨脹,細(xì)胞變成圓球形,細(xì)胞間隙變大,胞質(zhì)粗糙,可見(jiàn)有較多的細(xì)胞碎片。全方組細(xì)胞表面粗糙,多數(shù)細(xì)胞呈空泡樣結(jié)構(gòu),有大量的細(xì)胞碎片。2.理氣清熱活血方及其拆方均能抑制SW579細(xì)胞生長(zhǎng),全方抑制作用最強(qiáng),抑制率隨藥物濃度、時(shí)間的增加而上升,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制呈現(xiàn)劑量—效應(yīng)和時(shí)間—效應(yīng)依賴(lài)關(guān)系。3.人甲狀腺癌SW579細(xì)胞可檢測(cè)到TSHR、PLC-

4、β、PKC-α蛋白分子的超量表達(dá)。4.用IC50藥物濃度處理細(xì)胞時(shí),理氣清熱活血方及其拆方均能調(diào)節(jié)TSHR-PLC-β-PKC-α信號(hào)通路各個(gè)蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)論:1.理氣清熱活血方及其三個(gè)拆方對(duì)人甲狀腺癌細(xì)胞SW579的生長(zhǎng)均有抑制,全方組效果最好,理氣、清熱、活血三法具有協(xié)同效應(yīng)。2.理氣清熱活血方及其拆方均能降低SW579細(xì)胞TSHR–PLC–β-PKC-α信號(hào)通路各蛋白表達(dá)的水平,理氣清熱活血方及其三個(gè)拆方抑制甲狀腺癌