防己散質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、防己散收載于《中國獸藥典》2005年版，由防己、厚樸、茯苓、肉桂、胡蘆巴、黃芪、補骨脂、澤瀉、豬苓、川楝子和巴戟天十一味中藥組成，具有補腎健脾，利尿除濕之功效，主治腎虛浮腫。主治大家畜腎虛浮腫之癥，廣泛用于畜牧業(yè)生產(chǎn)當中。具不完全統(tǒng)計，目前全國有近百家獸藥生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)該產(chǎn)品。防己散現(xiàn)行質(zhì)量標準，其鑒別項是以顯微鑒別的方法對厚樸、肉桂、黃芪、茯苓、胡蘆巴、補骨脂和澤瀉七味藥材進行鑒別，無薄層色譜鑒別方法和含量測定方法?，F(xiàn)依照《中國獸藥典》

2、委員會辦公室下達的對《中國獸藥典》2010年版中防己散質(zhì)量標準完善和提高的研究任務，本論文對防己散的質(zhì)量控制方法進行了研究。 (1)本研究建立了同時鑒別防己散中防己藥材的粉防己堿和防己諾林堿的TLC鑒別方法，采用青島海洋硅膠G板(規(guī)格100×200mm，厚度0.20～0，25mm；三色分開)；供試品溶液制備：乙醇30ml，加熱回流1h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；展開劑為三氯甲烷-丙酮-甲醇(6

3、：1:1)；噴以稀碘化鉍鉀試液，在日光下檢視。觀察結果為在樣品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的兩個斑點。本方法簡便、快速，為防己散的質(zhì)量評價提供指標。 (2)本研究建立了同時鑒別防己散中厚樸藥材的厚樸酚與和厚樸酚的TLC鑒別方法，采用青島海洋硅膠G板；供試品溶液制備：甲醇25ml，密塞，振搖30min，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液；展開劑為苯-甲醇(27：1)；噴以1％香草醛硫酸溶液，在100℃加熱至斑點

4、顯色清晰，在日光下檢視。觀察結果為在樣品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的兩個斑點。本方法簡便、快速，為防己散的質(zhì)量評價提供指標。 (3)本研究建立了鑒別防己散中肉桂藥材的桂皮醛的TLC鑒別方法，采用青島海洋硅膠G板；供試品溶液制備用乙醇20ml，冷浸20min，時時振搖，濾過，濾液作為供試品溶液。展開劑為石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(17：3)；噴以二硝基苯肼乙醇試液，在日光下檢視。觀察結果為在樣品色譜中，與對

5、照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。本方法簡便、快速，為防己散的質(zhì)量評價提供指標。 (4)本研究建立了同時測定防己藥材中防己藥材的粉防己堿和防己諾林堿含量的HPLC法。采用Waters公司C18柱(150mm×4.6mm，5μm)，流動相為乙腈-0.2％磷酸水溶液(63：37)三乙胺調(diào)pH至8.0，檢測波長282nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃。對防己藥材中的有效成分粉防己堿和防己諾林堿進行同時含量測定，其線性范圍分

6、別為52.55～525.5μgml/L(r=0.9995)和27.30～273.0μgml/L(r=0.9996)；平均回收率分別為98.7％(RSD=1.5％)和97.8％(RSD=2.3％)。該方法此方法比《中國獸藥典》2005年版收載的對防己藥材的高效液相含量測定方法更簡便、快速、準確，方法專屬性強，重現(xiàn)性好。 (5)本研究建立了同時測定防己散中防己藥材的粉防己堿和防己諾林堿含量的HPLC法。色譜條件采用了本研究中防己藥材

7、含量測定的色譜條件，平均回收率分別為98.1％(RSD=1.9％)和97.9％(RSD=2.2％)。該方法簡便、準確和重復性好的特點，為防己散的質(zhì)量控制提供了定量方法。 (6)本研究建立了同時測定防己散中厚樸藥材的厚樸酚與和厚樸酚含量的HPLC法。采用Waters公司C18柱(150mm×4.6mm，5μm)，流動相為甲醇-水(7：22)，檢測波長294nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃。對防己散中的有效成分厚樸酚與和厚樸

8、酚進行同時含量測定，其線性范圍分別為20.26～202.6μgml/L(r=0.9995)和12.42～124.2μgml/L(r=0.9992)；平均回收率分別為96.7％(RSD=2.3％)和96.7％(RSD=2.5％)。該方法也具有簡便、準確和重復性好的特點，進一步為防己散的質(zhì)量控制提供了定量方法。 本研究建立了防己散中防己藥材、厚樸藥材和肉桂藥材的薄層色譜鑒別方法；防己藥材和厚樸藥材的高效液相色譜含量測定方法，較系統(tǒng)地