脂多糖作用于人蛻膜細(xì)胞后COX-2表達(dá)的研究.pdf

1、目的：研究體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞，經(jīng)不同濃度脂多糖(LPS)作用后，蛻膜細(xì)胞中的炎性因子誘導(dǎo)酶環(huán)氧合酶2(COX-2)表達(dá)差異，探索COX-2過度表達(dá)與蛻膜細(xì)胞感染的相關(guān)性。
　　 方法：收集正常早孕期人工流產(chǎn)術(shù)中的蛻膜組織，進行體外原代細(xì)胞培養(yǎng)。當(dāng)蛻膜細(xì)培養(yǎng)3-4代后將其分成5組，分別加入脂多糖使其終濃度分別為0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml。作用蛻膜細(xì)胞48小時后，1)通過激光共

2、聚焦-免疫熒光技術(shù)檢測COX-2蛋白在蛻膜細(xì)胞中的表達(dá)差異2)在收集各組的蛻膜細(xì)胞提取mRNA，并采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測各組中COX-2 mRNA的表達(dá)水平，并分析各組間的表達(dá)有無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 結(jié)果：1)通過激光共聚焦-免疫熒光染色技術(shù)檢測到各組人蛻膜細(xì)胞后，細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核中均有COX-2蛋白表達(dá)，且加入LPS作用后各實驗組與對照組相比，COX-2表達(dá)差異顯著，P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義；且隨著

3、LPS濃度逐漸升高，COX-2蛋白表達(dá)逐漸增強。2)不同濃度LPS作用蛻膜細(xì)胞后，各實驗組與對照組相比較，COX-2mRNA表達(dá)差異顯著，P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義；且隨著LPS濃度的增加，COX-2mRNA表達(dá)逐漸增強。
　　 結(jié)論：1)LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后，COX-2的蛋白表達(dá)增加，且隨著LPS的濃度逐漸增加COX-2蛋白表達(dá)逐漸增強；2)LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后，COX-2的mRNA表達(dá)增加，且隨著