蘋果MdHB1基因啟動子的克隆及特征分析.pdf

1、MdHB1是一個轉錄因子，屬于蘋果HD-ZipI亞家族的成員，根據(jù)先前的報道，MdHB1能夠與MdACO1啟動子結合，進而調控乙烯生物合成。本試驗以‘皇家嘎啦’葉片為試材，克隆MdHB1基因啟動子，然后以煙草為材料，利用農桿菌介導的瞬時轉化技術來探究蘋果MdHB1基因啟動子的特性。本試驗結果如下:
　　1、克隆了長度為1057bp的MdHB1基因啟動子，利用生物信息學軟件對MdHB1基因啟動子進行轉錄起始位點和順式作用元件的分析，

2、結果顯示轉錄起始位點(TSS)、CAAT BOX、TATA BOX分別位于翻譯起始位點(ATG)上游266bp、319bp、308bp的位置。在這一段基因啟動子區(qū)域內存在響應激素和環(huán)境因素的順式作用元件，如ERE、ABRE、ARE、G-Box等。
　　2、啟動子5，端序列缺失試驗表明，當啟動子長度為680bp時，活性最低，當啟動子長度為266bp時，仍具有較高的啟動子活性。5'UTR（非編碼區(qū)域）在基因表達過程中可能起到一個積極的

3、作用。
　　3、通過農桿菌介導的瞬時轉化技術，獲得含有長度為1057bp啟動子的轉基因煙草，在生物和非生物因素的處理下，啟動子受到乙烯、黑暗的正調控作用，而脫落酸(ABA)、水楊酸(SA)、假單胞丁香桿菌(DC3000)和機械傷對啟動子的正調控作用較微弱，赤霉素(GA)則抑制啟動子的活性。
　　4、乙烯響應元件(距ATG上游576bp)能夠響應外源乙烯正調控作用，當外源乙烯處理濃度逐漸增大時，正調控效應逐漸升高達到最大值，然