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1、目的:探討葉酸對(duì)柯薩奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因與蛋白表達(dá)變化的影響。
方法:取成熟健康雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為四組:正常對(duì)照組;葉酸組;柯薩奇B3病毒組;葉酸對(duì)柯薩奇B3病毒感染干預(yù)組。各組大鼠與成熟雄性大鼠置于交配籠中1∶1合籠。對(duì)照組大鼠自由進(jìn)水和食物;葉酸組大鼠用補(bǔ)充葉酸的飼料喂養(yǎng);柯薩奇病毒B3組大鼠用柯薩奇B3病毒腹腔注射持續(xù)5天;柯薩奇病毒+葉
2、酸組,用補(bǔ)充葉酸的飼料喂養(yǎng),柯薩奇B3病毒腹腔注射5天。待自然分娩后取乳鼠心臟,液氮保存檢測(cè)備用。制作心肌細(xì)胞病理切片觀察乳鼠心肌損傷;tunel法檢測(cè)乳鼠心肌凋亡細(xì)胞;Western blot及 RT-PCR測(cè)定乳鼠心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白(Bax,Bcl-2,Caspase-3)及基因表達(dá)。
結(jié)果:納入實(shí)驗(yàn)大鼠40只,其中病毒組死亡3只,1只中途流產(chǎn),1只所產(chǎn)乳鼠中有2只為死胎,病毒加葉酸組死亡1只,35只母鼠所產(chǎn)的乳鼠進(jìn)入結(jié)
3、果分析。懷孕大鼠注射柯薩奇病毒后乳鼠心肌細(xì)胞損傷明顯,光鏡可見心肌細(xì)胞崩解、斷裂;tunel法可見凋亡細(xì)胞增加,加用葉酸后狀態(tài)改善。病毒組乳鼠心肌細(xì)胞Bax,Caspase-3蛋白及基因的表達(dá)高于葉酸+病毒組(P<0.05);葉酸+病毒組Bcl-2蛋白及基因的表達(dá)高于病毒組(P<0.01)。
結(jié)論:早期懷孕母鼠感染柯薩奇病毒B3后可導(dǎo)致乳鼠心肌細(xì)胞損傷明顯及凋亡增加,補(bǔ)充葉酸對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞凋亡具有明顯的預(yù)防作用,其作用機(jī)制通過(guò)
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