阿苯噠唑對蚯蚓的細胞和分子毒理機制研究.pdf

1、隨著集約化畜牧業(yè)的快速發(fā)展，獸藥的大量和不合理使用所引起的環(huán)境污染問題已引起了人們極大的關注。但目前所采用的個體水平上的急慢性毒理實驗不能從本質上反應藥物作用于環(huán)境l生物的毒性效應，尤其是潛在毒性。隨著分子生物學技術在生態(tài)毒理學中的應用，使藥物殘留的l環(huán)境和食品安全的早期診斷成為可能。本研究以蚯蚓作為十壤環(huán)境的指示動物，從個體、組織、細胞、基岡水平上研究了獸藥阿苯噠唑(ABZ)對蚯蚓的毒理機制，從微觀水平對阿苯噠唑等抗寄生蟲藥物的環(huán)境安

2、全性評價提供依據(jù)。研究分為以下幾部分： 第一部分，從個體水平上研究了不同ABZ劑量對蚯蚓存活和生長率的影響。結果表明，糞便染毒14天蚯蚓的半數(shù)致死率為597 mg kg<'-1>。染毒42天的生長實驗結果表明，劑量在30 mg kg<'-1>以下對蚯蚓生長沒有影響，而劑量在90 mg kg<'-1>以上在生長后期14～42天明顯降低了蚯蚓生長率。 第二部分，研究了ABZ染毒對蚯蚓體不同部位(前、中、后部)的組織酶活性的變

3、化。測定了1OO，200，400，600 mg kg<-1>濃度下，第2，7，14天酸性磷酸酶(．AP)、三磷酸腺苷酶(ArPase)和谷胱甘肽硫轉移酶(GS3’)活性的變化。結果表明，組織酶活性與染毒濃度、暴露時問和蚯蚓體的部位密切相關。染毒時問越長，毒性反應越明顯，其中AP、AI’。Pase對較低濃度反應比較敏感，14d時在lOO mg kg<'-1>的酶活性被顯著性抑制，但對AP的活性變化比較敏感的部位是前部，而ATPase敏感部

4、位是中部和后部，這可能與該部位的結構和功能有關。 第三部分，研究了ABZ染毒對蚯蚓的細胞毒性。實驗測定了在低濃度(100 mg kg<'-1>)和高濃度(600 mg kg<'-1>)兩種情況下，第14天的組織細胞顯微和超顯微結構的變化。結果表明，低濃度染毒使皮膚角質層變厚，表現(xiàn)出蚯蚓的皮膚防御機制；但濃度達到600 mg kg<'-1>時，皮膚角質層變薄，皮膚防御受到破壞；腸道上皮細胞的線粒體、內質網(wǎng)等超顯微結構隨著染毒濃度增

5、加損傷程度增加，600 mg kg<'-1>時，染色質發(fā)生凝聚或邊集；貯精囊在100 mg kg<'-1>時發(fā)生了嚴重損傷，大量精子細胞的細胞核變形、細胞膜擴張、線粒體空泡化、微管系統(tǒng)破壞、糖原分布紊亂等病變?？磥?，ABZ染毒對蚯蚓的繁殖毒性比較大。 第四部分，研究了ABZ染毒的蚯蚓分子毒性。采用熒光定量RT-PCR技術，研究了不同劑量ABZ對蚯蚓不同部位的I-rRNA和Hsp90基因表達的影響。這兩個基因與能量代謝有密切聯(lián)系。