結(jié)直腸癌病人HLA、MICA基因頻率分布及血清sMICA表達(dá)水平研究.pdf

1、目的：探討sMICA在結(jié)直腸癌患者血清中的表達(dá)及臨床意義。研究結(jié)直腸癌患者血清sMICA與臨床病理學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。對(duì)比分析結(jié)直腸癌患者術(shù)前術(shù)后血清sMICA的變化，初步探討手術(shù)對(duì)結(jié)直腸癌患者血清sMICA蛋白的影響及脫落機(jī)制。分析106例結(jié)直腸癌患者的HLA、MICA的基因頻率分布，初步探討人類(lèi)白細(xì)胞抗原（HLA）、主要組織相容性復(fù)合體I類(lèi)鏈相關(guān)蛋白A（MICA）基因遺傳免疫因素與廣東地區(qū)結(jié)直腸癌的相關(guān)性?；驕y(cè)序鑒別新等位

2、基因HLA-A*33:03:01。
　　方法：第一部分:選擇2011-12/2013-12在廣州市第一人民醫(yī)院胰脾外科行手術(shù)切除、病理證實(shí)為結(jié)直腸癌患者48例，其中男37例，女11例：年齡35-82歲，中位數(shù)59歲，另取同時(shí)期在本院體檢的51例非結(jié)直腸癌的正常人作為對(duì)照組，其中男36例，女23例；年齡25-79歲，中位數(shù)56歲?；颊呔炇鹬橥鈺?shū)，符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)規(guī)定，分別于患者入院第一天、術(shù)后第三天，第一次回院化療前一天抽取外周

3、血。采取ELISA檢測(cè)血清sMICA蛋白，放射免疫法（RIA）定量檢測(cè)CEA、CA19-9。觀察sMICA蛋白水平與臨床病理學(xué)參數(shù)及CEA、CA19-9等腫瘤指標(biāo)的關(guān)系.數(shù)據(jù)表示方法為M（Q25、Q75），應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。第二部分:選擇106名被確診為結(jié)直腸癌患者和118名健康獻(xiàn)血者采用直接測(cè)序法進(jìn)行HLA及MICA基因高分辨分型。其中結(jié)直腸患者組中男性78例，女性28例，年齡33～78歲，平均年齡(

4、56.15±25)歲：健康獻(xiàn)血者組中年齡18～49歲，各項(xiàng)體檢指標(biāo)均正常。應(yīng)用PyPopWin32統(tǒng)計(jì)HLA及MICA各等位基因頻率的分布， HLA-MICA基因與腫瘤的免疫遺傳關(guān)聯(lián)分析采用SPSS16.0和Helixtree軟件分析
　　血清sMICA與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)（CEA、CA19-9）相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)性分析，臨床病理參數(shù)多組樣本間sMICA、CEA、CA19-9的比較采用Kruska-Wallis檢驗(yàn)，兩組

5、樣本比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。患者術(shù)前、術(shù)后血清sMICA蛋白比較采取配對(duì)的Wilicon秩和檢驗(yàn)。結(jié)直腸癌患者與對(duì)照組血清sMICA蛋白的比較采用兩樣本獨(dú)立的秩和檢驗(yàn)。手術(shù)組之間的轉(zhuǎn)陰率比較用卡方檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：1、結(jié)直腸癌患者術(shù)前血清sMICA水平中位數(shù)0.85(0.13,2.17) ng/ml，明顯高于正常對(duì)照組的0.39(0.02，1.29)ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=2.118，P＜0.05）。
　

6、　2、結(jié)直腸癌患者術(shù)后回院化療時(shí)血清sMICA水平中位數(shù)明顯低于手術(shù)前及術(shù)后三天的血清sMICA中位數(shù)：術(shù)后第三天血清sMICA水平與術(shù)前血清sMICA差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，
　　3、血清sMICA水平與臨床病理參數(shù)分析提示，血清sMICA的水平與患者的年齡、性別、腫瘤的部位、病理類(lèi)型、出現(xiàn)癥狀的時(shí)間無(wú)密切關(guān)系：而與腫瘤的Ducks分期、浸潤(rùn)程度、組織學(xué)分化、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、體重減輕、腫瘤大小有關(guān)。C、D期結(jié)直腸癌患

7、者血清的sMICA水平明顯高于A、B期（Z=-1.763， P＜0.05）；有淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清的sMICA水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的（H=22.378、Z=-1.879，P＜0.05）；腫瘤直徑大于4.0cm者血清的sMICA水平明顯高于腫瘤直徑小于4.0cm（Z=-2.183,P＜0.05）：隨著腫瘤細(xì)胞的高、中、低分化程度不同，患者的血清sMICA蛋白水平依次增高（H=22.87， P＜0.05）。
　　4、結(jié)直腸癌

8、患者血清的sMICA水平與CA19-9成正相關(guān)（r=0.565,p＜0.05）,與CEA不相關(guān)（r=0.197,p＞0.05）。
　　5、術(shù)前結(jié)直腸癌患者血清sMICA、CEA、CA19-9陽(yáng)性率的比較：術(shù)前58例結(jié)直腸癌者中有46例血清 sMICA高于正常人上限（0.500ng/ml），陽(yáng)性率為79.3％，而CEA、 CA19-9的陽(yáng)性率分別為46.6%、39.7%。
　　6、術(shù)后一月結(jié)直腸癌患者血清sMICA、CEA、C

9、A19-9變化：術(shù)前血清sMICA陽(yáng)性的39例結(jié)直腸癌患者中，術(shù)后一月有26例轉(zhuǎn)陰，其中根治性手術(shù)24例，姑息手術(shù)2例子，兩組間有顯著差異（X2=30.44，P＜0.0001）,術(shù)前血清CEA陽(yáng)性的23例結(jié)直腸癌患者中，術(shù)后一月有11例轉(zhuǎn)陰，其中根治性手術(shù)10例，姑息手術(shù)1例子，兩組間有顯著差異（X2=8.478，P＜0.0001），術(shù)前血清CA19-9陽(yáng)性的21例結(jié)直腸癌患者中，術(shù)后一月有,9例轉(zhuǎn)陰，其中根治性手術(shù)9例，姑息手術(shù)0例子

10、，兩組間有顯著差異（X2=27.923，P＜0.0001）
　　7、HLA-A*02:01確認(rèn)為大腸癌風(fēng)險(xiǎn)等位基因，HLA-B與MICA位點(diǎn)連鎖不平衡存在具結(jié)直腸癌免疫遺傳相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)單倍型的可能。
　　8、發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的等位基因 HLA-A*33:03:14.已提交 GeneBank，并于2013年2月被世界衛(wèi)生組織 HLA因子命名委員會(huì)正式命名為 HLA-A*33:03:14。Genbank注冊(cè)號(hào)為HWS10017874。

11、r>　　結(jié)論：
　　1、結(jié)直腸癌患者血清的sMICA蛋白明顯高于正常人，其升高的水平與腫瘤的Ducks分期、浸潤(rùn)深度、組織學(xué)分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、體重減輕、腫瘤大小有密切的關(guān)系。
　　2、血清sMICA蛋白、CEA、CA19-9的手術(shù)前后動(dòng)態(tài)檢測(cè)有助于臨床判定病情、監(jiān)控療效，同時(shí)檢測(cè)結(jié)直腸癌患者血清sMICA的水平有可能作為診斷、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)及預(yù)后的重要指標(biāo)。
　　3、結(jié)直腸癌病人及具相同遺傳背景的人群在術(shù)前可找出高?；蛉巳?/p>