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文檔簡介
1、目的:建立衰老大鼠模型,提取大鼠AM,探討LPS對老齡大鼠AM產(chǎn)生CK的影響,以及AM在受LPS刺激前后的凋亡,判定其在肺部感染中的作用,從而為臨床醫(yī)師研究新的治療方法提供新的科研依據(jù)。 方法:①將Wistar大鼠隨機(jī)分為兩組,任取其中一組用D-gal(20mg/kg體重)腹腔注射,每天一次,連續(xù)6周制備衰老大鼠模型;另一組青年大鼠作為對照。 ②采用支氣管肺泡灌洗和細(xì)胞貼壁的方法獲取AM,用瑞氏染色鑒定純度、胎盤藍(lán)染色測
2、定活細(xì)胞數(shù)。 ③將每組獲取的AM再隨機(jī)均分為LPS刺激組及陰性對照組,LPS刺激組細(xì)胞在貼壁2小時(shí)后加入含10mg.l<'-1>LPS的1640培養(yǎng)液,24小時(shí)后用ELISA試劑盒分別測定細(xì)胞上清液中TNF-α、ET-1的含量,并用AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒測定細(xì)胞凋亡百分率,觀察青老年大鼠在受LPS刺激前后的差異。 結(jié)果:1.①青老年大鼠LPS刺激組AM培養(yǎng)上清中TNF-α、ET-1均高于陰性對照組;
3、②老年大鼠LPS刺激組BALF上清中TNF-α((31.32±2.38)pg.ml<-1>)高于青年大鼠LPS刺激組((25.48±3.52) pg.ml<'-1>,P<0.05):老年大鼠LPS刺激組ET-1((3.91±0.11)pg.ml<'-1>)高于青年大鼠LPS刺激組((3.17±0.11)pg.ml<'-1>,P<0.05)。 2.衰老大鼠LPS刺激組細(xì)胞凋亡百分率(50.57%±2.29%)高于陰性對照組(17.
4、25%±1.68%,P<0.05);青年大鼠LPS刺激組(28.22%±1.75%)較陰性對照組(14.25%±3.09%,P<0.05)高,青老年陰性對照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:1.①大鼠AM分泌TNF-α、ET-1在LPS刺激后有明顯的增多;②老年大鼠AM受LPS刺激后分泌TNF-α、ET-1 的量明顯高于青年組。 2.LPS刺激組的 AM 凋亡率衰老大鼠明顯高于青年組。 總之,老年大鼠對LPS刺激的
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