肌萎縮側(cè)索硬化癥患者骨骼肌蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究和利魯唑治療肌萎縮側(cè)索硬化癥療效的長程觀察.pdf

1、肌萎縮側(cè)索硬化癥(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是發(fā)生于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的緩慢進(jìn)展、進(jìn)行性加重、致死性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性疾病.由于上、下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性壞死,患者出現(xiàn)肌無力和肌萎縮多在發(fā)病后3-5年死于呼吸衰竭和肺部感染.ALS的病因尚不清楚,目前對(duì)ALS病因和發(fā)病機(jī)制有多種學(xué)說,但都不能圓滿解釋該病的發(fā)病機(jī)制.近年來開展的蛋白質(zhì)組學(xué)研究可以在大通量、平行條件下分離和鑒定組織細(xì)胞所表達(dá)的所有蛋白質(zhì),該課題采用

2、蛋白質(zhì)組學(xué)研究的關(guān)鍵技術(shù)雙向電泳技術(shù),對(duì)ALS患者萎縮肌細(xì)胞的總蛋白、周圍神經(jīng)離斷傷患者受累肌肉總蛋白與正常人肌細(xì)胞的總蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳分離.對(duì)所得2-DE凝膠進(jìn)行計(jì)算機(jī)軟件分析,根據(jù)2-DE凝膠上所顯示的已被分散發(fā)布的蛋白點(diǎn)的表觀分子量和表觀等電點(diǎn)以及某一個(gè)蛋白點(diǎn)的含量進(jìn)行對(duì)比分析,尋找三者間存在的蛋白質(zhì)合成種類和數(shù)量的差異,發(fā)現(xiàn)了ALS患者肌細(xì)胞蛋白質(zhì)合成整體上的變化.通過ALS患者和周圍神經(jīng)離斷傷患者受累肌肉蛋白質(zhì)的差異合成初

3、步確認(rèn)了中樞失神經(jīng)支配和周圍失神經(jīng)支配導(dǎo)致的骨骼肌萎縮存在的不同蛋白分子機(jī)制.通過建立骨骼肌細(xì)胞2-DE樣品制備和實(shí)驗(yàn)體系.在實(shí)驗(yàn)中改進(jìn)了骨骼肌蛋白樣品的制備方法,保證了用于進(jìn)行2-DE電泳的肌細(xì)胞蛋白樣品的組織單一性,解決了蛋白質(zhì)組學(xué)研究的基本前提即實(shí)驗(yàn)對(duì)象——組織蛋白單一性的問題.ALS診斷主要依靠臨床表現(xiàn)和肌電圖變化,而在臨床上一旦能夠確立診斷患者的病程往往已不可逆轉(zhuǎn),因此臨床實(shí)踐迫切地需要能夠建立ALS的早期診斷方法.該病的治療

4、方法除利魯唑(一種谷氨酸受體拮抗劑)能夠延長患者的存活期外其他的各種治療方法均無確切療效.ALS患者、周圍失神經(jīng)支配患者受累骨骼肌差異表達(dá)譜的建立可以幫助我們發(fā)現(xiàn)疾病相關(guān)或標(biāo)記分子和藥物靶向作用分子,以及不同類型肌萎縮相關(guān)蛋白的辨認(rèn),在臨床上可以根據(jù)ALS患者、周圍失神經(jīng)支配患者受累骨骼肌的蛋白質(zhì)差異合成譜設(shè)計(jì)這些疾病的蛋白質(zhì)芯片,有助于該病的早期診斷.還可以提供通過"補(bǔ)充"或"拮抗"異常蛋白質(zhì)的方法對(duì)該病進(jìn)行有針對(duì)性的治療.同時(shí)通過應(yīng)