結核分枝桿菌感染人源樹突狀細胞的研究.pdf

1、結核病作為全球性的健康問題，其發(fā)病率和死亡率逐年上升，每年導致8百萬人發(fā)病，2-3百萬人死亡。世界衛(wèi)生組織已將結核病列為重點控制的三種傳染病之一，強調遏制結核病行動已到了刻不容緩的程度。結核分枝桿菌(MTB)是結核病的病原菌。MTB在感染宿主機體的過程中，與宿主抗原遞呈細胞一一樹突狀細胞(DCs)的相互作用對機體的免疫應答起始起到了決定性的作用。DCs是最有效的抗原呈遞細胞。樹突狀細胞能夠攝取外來物質，包括結核分枝桿菌，并將其呈遞給效應

2、性淋巴細胞，激發(fā)宿主對抗病原微生物感染的免疫反應。因此結核分枝桿菌與樹突狀細胞的相互作用在感染初期機體發(fā)動免疫應答中十分重要。研究樹突狀細胞和結核分枝桿菌間的相互作用，有利于從根本上了解細菌．宿主作用機理，為闡明結核分枝桿菌逃避免疫的機制提供依據。 本研究利用雙向電泳技術對結核分枝桿菌H37Rv、H37Ra株感染人源樹突狀細胞前后的全細胞蛋白表達譜進行差異比較和分析，發(fā)現H37Rv株的感染能特異地引致差異表達蛋白斑點23個。利用

3、基質輔助激光解析／電離串聯飛行時間質譜技術對其中的4個表達明顯上調的蛋白質斑點進行分析鑒定，獲得4個明確的肽指紋圖譜，通過在數據庫中檢索分析，確定這4個蛋白質分別為人亞砷酸誘導ATP酶I(hASNA-I)，膜聯蛋白IV(A肌exinIV)，γ-肌動蛋白(γ-actin)，熱休克蛋白27(HSP27)。上述發(fā)現有助于了解結核分枝桿菌入侵早期導致的樹突狀細胞蛋白質組表達變化，為深入研究結核分枝桿菌一宿主相互作用提供了探索方向。 為了

4、更全面的了解細菌一宿主細胞間的相互作用，本研究利用實時熒光定量PCR(RT-PCR)在轉錄組水平對結核分枝桿菌感染樹突狀細胞后所導致的差異變化作了進一步分析。發(fā)現H37Rv株感染樹突狀細胞所特異引致上調表達的4個蛋白，其在轉錄水平上也呈上調表達。上述對結核分枝桿菌感染樹突狀細胞的蛋白質組水平以及轉錄組水平的研究，較全面地探討了結核分枝桿菌入侵宿主機體過程中，細菌一宿主細胞間的相互作用，有助于闡明細菌入侵機制與潛伏機理，為針對結核分枝桿菌