G-CSF和GM-CSF動(dòng)員小鼠外周血干細(xì)胞效果的比較研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:比較粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)對(duì)小鼠外周血造血干細(xì)胞的動(dòng)員作用,并檢測(cè)動(dòng)員過(guò)程中小鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化,從而選擇最佳的動(dòng)員方案。 方法: 1.分組與給藥方法BALB/c小鼠,隨機(jī)分成6組,每組12只。 (1)實(shí)驗(yàn)組:共分成5組。 A組:連續(xù)5天皮下注射重組人G-CSF(rhG-CSF)400 gg·kg<’-1>d<’-1>。

2、 B組:連續(xù)5天皮下注射重組人GM-CSF(rhGM-CSF)400 μg·kg<’-1>·d<’-1>。 C組:連續(xù)5天同時(shí)皮下注射G-CSF 200μg·kg<’-1>·d<’-1>。+GM-CSF 200 μg·kg<’-1>·d<’-1>。 D組:前3天連續(xù)皮下注射GM-CSF 400μg·kg<’-1>·d<’-1>,后2天皮下注射G-CSF400μg·kg<’-1>·d<’-1>。 E組:

3、前3天連續(xù)皮下注射G-CSF 400μg·kg<’-1>·d<’-1>,后2天皮下注射GM-CSF400μg·kg<’-1>·d<’-1>。 (2)對(duì)照組:連續(xù)5天皮下注射生理鹽水0.2 ml。 2.檢測(cè)指標(biāo)與方法在動(dòng)員不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。 (1)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)采用顯微鏡計(jì)數(shù)法。 (2)外周血CD34<’+>、CD34<’+>CD<,38><’->細(xì)胞檢測(cè)采用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)。

4、 (3)外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)采用FCM檢測(cè)。 (4)外周血造血干細(xì)胞集落培養(yǎng)粒-單核細(xì)胞集落形成單位(CFU-GM)的培養(yǎng)采用半固體瓊脂培養(yǎng)法。 結(jié)果: 1.外周血白細(xì)胞的變化小鼠注射動(dòng)員劑后,除對(duì)照組外,各實(shí)驗(yàn)組在注射后24小時(shí)白細(xì)胞升高幅度最大,白細(xì)胞數(shù)均在第5天達(dá)高峰,明顯高于對(duì)照組和用藥前(P<0.01)。 2.外周血CD<,34><'+>、CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞

5、變化予動(dòng)員劑后,除對(duì)照組外,各實(shí)驗(yàn)組隨用藥時(shí)間延長(zhǎng)CD<,34><'+>細(xì)胞、CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞比例逐漸升高,第4天升高幅度較大,第5天各實(shí)驗(yàn)組均達(dá)高峰。高峰期各實(shí)驗(yàn)組CD<,34><'+>細(xì)胞、CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞比例顯著高于對(duì)照組及動(dòng)員前(P<0.001)。實(shí)驗(yàn)組中,A組CD<,34><'+>細(xì)胞比例顯著高于B組(P<0.001),C、D、E組CD<,34><'+>細(xì)胞比例較

6、A組明顯增高(P<0.05);C、D、E組CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞比例明顯高于A組(P<0.001);B組CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞比例顯著高于C、D、E組(P<0.001)。第6天,除對(duì)照組外,各實(shí)驗(yàn)組CD<,34><'+>細(xì)胞、CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞比例迅速下降。 3.外周血CFU-GM產(chǎn)率比較在動(dòng)員第4、5、6天,各實(shí)驗(yàn)組外周血CFU-GM數(shù)均顯著高于

7、對(duì)照組及動(dòng)員前(P<0.001),各組CFU-GM產(chǎn)率均在第5天達(dá)高峰值,C、D、E組CFU-GM數(shù)明顯高于A、B組(P<0.05)。第6天各實(shí)驗(yàn)組外周血CFU-GM數(shù)均顯著低于第5天CFU-GM數(shù)(P<0.01)。 4.外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化動(dòng)員第5天,各實(shí)驗(yàn)組外周血CD<,3><'+>細(xì)胞比例均顯著高于對(duì)照組及動(dòng)員前(P<0.001);CD<,3><'+>CD<,8><'+>細(xì)胞比例明顯高于對(duì)照組及動(dòng)員前(P<0.05),

8、CD<,3><'+>CD<,4><'+>/CD<,3><'+>CD<,8><'+>的比值較對(duì)照組及動(dòng)員前降低(P<0.05);CD<,3><'+>CD<,4><'->CD<,8><'->細(xì)胞比例明顯高于對(duì)照組及動(dòng)員前(P<0.001),CD<,3><'+>CD<,4><'->CD<,8><'->細(xì)胞比例增高的順序依次為實(shí)驗(yàn)B組>D組>C組>E組>A組。即單用GM-CSF組最高,單用G-CSF組最低。 結(jié)論: 1.G-CS

9、F與GM-CSF聯(lián)合方案動(dòng)員CD<,34><'+>細(xì)胞、CD<,34><'+>CD<,38><'->細(xì)胞和CFU-GM產(chǎn)率較高,收集的造血干細(xì)胞更具有早期干細(xì)胞的特征。 2.G-CSF與GM-CSF聯(lián)合方案動(dòng)員后CD<,3><'+>細(xì)胞、CD<,3><'+>CD<,8><'+>細(xì)胞及CD<,3><'+>CD<,4><'->CD<,8><'->細(xì)胞比例較動(dòng)員前明顯升高,有利于發(fā)揮T細(xì)胞的免疫負(fù)調(diào)控作用。 3.G-CSF聯(lián)合

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