葉酸受體型磁共振靶向?qū)Ρ葎┑闹苽渑c動物實驗研究.pdf

1、磁共振靶向?qū)Ρ葎┎粌H能夠提高病變的診斷正確率，還可反映病變的某些生物學(xué)特征，評價治療療效，臨床應(yīng)用前景廣闊，已成為分子影像學(xué)研究熱點之一。腫瘤分子生物學(xué)研究表明，在腫瘤細胞表面或腫瘤相關(guān)血管表面存在一系列受體并在腫瘤組織中過度表達，它與相應(yīng)配體或配體類似物能特異結(jié)合。受體和其配體的結(jié)合具有特異性、選擇性、飽和性、親合力強和生物效應(yīng)明顯等特點。這為腫瘤的靶向診斷提供了新的靶向途徑。研究表明，葉酸受體(folatereceptor,FR)在

2、大部分惡性腫瘤中，如卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、肺癌、腎癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和鼻咽癌中均高度表達，有時可比正常組織高出20-300倍，但在正常組織中的表達高度保守。其配體葉酸與葉酸受體有高親和力。 目的 該研究旨在研制能通過葉酸受體介導(dǎo)靶向腫瘤細胞實現(xiàn)MR靶向顯影的對比劑葉酸偶聯(lián)Gd-DTPA-Poly-L-Lysine(葉酸-PL-Gd-DTPA)，探討磁共振靶向?qū)Ρ葎┤~酸-PL-Gd-DTPA靶向荷人肺癌裸鼠顯像可行性及顯影特

3、點。 材料與方法 1.磁共振靶向?qū)Ρ葎┑闹苽渑c體外表征 在堿性條件下利用DTPA修飾聚賴氨酸(Poly-L-Lysine，PL)，合成大分子PL-DTPA為載體，與GdCl3反應(yīng)合成大分子對比劑PL-Gd-DTPA，在堿性條件下將葉酸與PL-Gd-DTPA偶聯(lián)成大分子多聚體，即得到實驗所需靶向?qū)Ρ葎?；采用高效液相色譜法(HPLC)測定大分子純度，高頻電感藕合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-AES)測定Gd3+含量，使用細胞葉

4、酸受體競爭結(jié)合法證明大分子活性。 2.磁共振靶向?qū)Ρ葎?folate-PL-Gd-DTPA)靶向荷人肺癌裸鼠MRI研究 將H460人肺癌細胞株傳代于BALB/C裸鼠皮下制成人肺腺癌裸鼠模型。經(jīng)鼠尾靜脈注入磁共振靶向?qū)Ρ葎ゝolate-PL-Gd-DTPA(n=3)，觀察模型注射前及注射后不同時間點瘤體、肝臟及腿部肌肉T1WI信號值變化情況。 3.磁共振靶向?qū)Ρ葎?folate-PL-Gd-DTPA)與常規(guī)對比劑(Gd-D

5、TPA)荷人肺癌裸鼠MRI顯像效果對照研究 荷人肺腺癌裸鼠模型10只隨機分成實驗組(n=6)和對照組(n=4)，實驗組動物分別經(jīng)鼠尾靜脈注入靶向?qū)Ρ葎ゝolate-PL-Gd-DTPA，對照組分別注入Gd-DTPA，觀察兩組動物注射前及注射后不同時間點瘤體、肌肉T1WI信號值變化情況，并進行對比。 結(jié)果 成功地制備出葉酸與Gd-DTPA-Poly-L-Lysine偶聯(lián)大分子多聚體(folate-PL-Gd-DTP

6、A)，該多聚體具備高純度、與葉酸受體高親和力，同時亦載帶高濃度Gd3+離子(每分子含56個Gd3+)；在靶向荷人肺癌裸鼠MRI研究中，試劑folate-PL-Gd-DTPA有向瘤體局部聚集的趨勢，峰值出現(xiàn)在約增強后48小時，最大強化率126.0％；而在肝臟中，強化效果亦明顯，峰值出現(xiàn)在約增強后6小時，之后即成下降趨勢。與常規(guī)對比劑(Gd-DTPA)對照: (1)所制備對比劑folate-PL-Gd-DTPA有明顯的靶向瘤體的效果

7、，實驗組瘤體各掃描時間點信號值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=29.30，P＜0.0001)，其平均峰值強化率達125.4％，峰值出現(xiàn)時間約注射后24-48小時；實驗組肌肉各掃描時間點信號值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.86，P=0.0579); (2)對照組瘤體各掃描時間點信號值差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(F=39.32，P＜0.0001)，強化峰值出現(xiàn)在0.5小時時間點；對照組肌肉增強后0.5小時時間點信號值與其他各時間點差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=2